酵母单/双杂交-文库构建/
价格:37600

酵母单/双杂交-文库构建/

产品属性

  • 品牌金开瑞
  • 产地武汉
  • 型号酵母单/双杂交-文库构建/文库筛选
  • 关注度74
  • 信息完整度
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产品描述

金开瑞拥有较齐全的cDNA文库,通过将已知基因作为诱饵,从选定的文库中筛选出与诱饵蛋白/诱饵序列存在特异相互作用的蛋白,材料用量少,获得全长的比例高。


技术应用

  酵母双杂交系统因其具有灵敏性高,功能强大,适应范围广等特点,现已被广泛应用于多个研究领域。

1、将已知基因作为诱饵,在选定的cDNA文库中筛选与诱饵蛋白相互作用的蛋白;

2、一对已知蛋白相互作用研究;

3、蛋白相互作用结构域和位点的研究;

4、建立基因组蛋白连锁图。

5、酵母单杂交技术是Li在酵母双杂交的基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。


服务优势

采用Clontech SMART专利技术,以总RNA为模板,用SMART方法反转录成cDNA,材料用量少,获得全长的比例高。


服务流程

1、酵母单/双杂交文库构建

接收订单及样品——总RNA提取——mRNA纯化——反转录——双链cDNA合成及纯化——共转至酵母感受态细胞(改造的Y1H)——转化效率测定——文库效价测定——结果交付


2、酵母单杂交文库筛选

接收订单及样品——诱饵载体及诱饵菌株构建——自激活检测——克隆数计算——阳性克隆菌株鉴定——结果交付

3、酵母双杂交文库筛选

接收订单及样品——诱饵载体的构建——毒性检测——测定杂交效率——阳性克隆菌株鉴定——结果交付



服务内容及说明

服务项目  客户提供最终交付
文库构建组织/细胞滴度在1×108以上的酵母文库菌液;文库PCR鉴定结果图片(阳性率在80%左右)
文库筛选promoter基因序列/质粒筛选过程中的全部原始图片;筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

针对酵母单杂交实验结果,可作进一步验证:

服务内容实验目的细分周期(工作日)
EMSA验证启动子和蛋白互做探针合成及标记10
EMSA实验20
双萤光素酶检测验证启动子和蛋白互做载体构建10-15
双萤光素酶检测25

注:1. 双萤光素酶检测默认使用293T细胞,使用其他细胞视培养及转染难度议价;
2. 双萤光素酶检测启动子-转录因子验证默认1个转录因子 + 启动子序列WT和Mut各1个;microRNA靶基因验证默认1个microRNA + 靶序列WT和Mut各1个,超过以上组合数量请询价。


酵母双杂交

服务项目客户提供最终交付
文库构建组织/细胞滴度在1×108以上的酵母文库菌液;文库PCR鉴定结果图片(阳性率在90%左右)
文库筛选蛋白序列/基因序列/质粒筛选过程中的全部原始图片;筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果

针对酵母双杂交实验结果,可作进一步验证:

服务内容实验目的细分周期(工作日)
Co-IP验证蛋白互做/20
GST pull-down验证蛋白互做GST pull-down+WB/银染20



武汉金开瑞生物工程有限公司

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