AAV 在眼科中的应用
AAV 在眼科的应用优势
1. 表达时间长: 绝大多数重组rAAV 不会整合到基因组上,而是在宿主细胞中串联形成附加体(episome)存在于细胞核中,分裂的细胞在细胞复制和分裂后会丢失附加体,并因此失去基因表达能力,而在细胞分裂不旺盛的组织中可持续表达5 个月以上。
2. 扩散性强: 体积小,滴度高,具有远高于腺病毒和慢病毒的扩散性。
3. 特异性强: 有十数种常用的血清型,不同的血清型对不同的脏器有较高的识别及感染能力。
4. 免疫原性低: 局部大剂量感染肌肉、脑、眼等组织时,很少有感染上的细胞之后被免疫系统所清除。这种特性对于动物实验显然极有帮助。
AAV 应用于眼科的文献综述
病毒类型 | 注射部位 | 病毒滴度( 量) | 注射方法 | 检测时间 | 代表文献 |
AAV | 小鼠双侧视网膜下 | 3.28x1012v.g/mL | 2 μL/ 视网膜, 在20-30s 内注射完毕 | 至少三周以后 | 【1】 |
小鼠角膜下注射 | 3×1012 v.g/mL | 1μL / 位点,速度 30nL/min, 留针 1 min | 4 周 | 【2】 |
AAV在眼科中的应用
AAV 在眼科的注射方法综述
原位注射——角膜下原位注射
1. 实验开始前,先将小鼠进行麻醉。
2. 然后将小鼠固定在台上,并将眼球部分突出。
3. 夹紧小鼠头部,并对其角巩膜缘处进行扎孔。扎孔时,一般选择角膜缘后1mm 位置,注意避开血管。
4. 判断是否扎孔成功。
5. 扎孔成功后,开始注射病毒。
6. 注射时,针尖垂直进入,随后倾斜,缓慢推注。
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