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基因调取
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基因调取
PIPES指数:1.0用户:应用:

型号型号:基因调取

品牌品牌:菩禾

产地产地:江苏

无锡菩禾生物医药技术有限公司

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核心参数
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产品描述

                       1服务内容
 
基因调取分为已知基因调取和未知基因调取,如果已知,直接根据其两端序列,设计引物,采用PCR的方法直接可将该基因扩增出来。若为已知功能的未知基因,则根据其相近物种中的相似基因设计引物,然后PCR。若为未知基因或者筛选基因,可用随机引物的办法扩增并可辅助其他方法进行,详细分类如下:

  1. 已知序列基因
    ① 原核生物原核生物基因没有内含子,可直接提基因组DNA 进行PCR 扩增,TA 克隆测序。
    ② 真核生物真核生物基因有内含子,需要提取总RNA 反转录为cDNA,设计特异性引物进行PCR 扩增,TA 克隆测序。
    2、未知或已知部分序列基因RACE 服务
    RACE,即cDNA 末端快速扩增技术(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE) ,是利用PCR技术由已知的部分cDNA 序列来获得完整cDNA 末端的方法,又称为锚定或单边PCR。有两种RACE 方法,分别用于扩增5′端或3′端,从而得到全长基因的cDNA。

 

  1. 服务说明
    ① 请您尽量提供目的基因表达量高的单一样品,提取总RNA 的实验材料要新鲜,采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂。最好能说明该基因在不同组织的表达丰度,如果基因的丰度较低或者未知序列较长,请提供尽量多的实验材料。
    ② 如果提供RNA 样品,要求总RNA 无降解,无DNA 污染,OD260/OD280:1.8-2.0。3' RACE 实验要求RNA量大于15 μg,5' RACE 实验要求总RNA 量大于25 μg。
    ③ 请提供大于100 bp 的已知序列及方向(请注明已知序列的5′ 端及3′ 端);如果已知序列比较短,建议先进行3′ RACE 再进行5′ RACE,以提高实验的成功率。
    ④我们会根据已知序列进行特异性扩增验证,如果验证结果与您提供的序列完全不符,得不到目的序列或为非目的基因的序列,我们将停止实验并收取实验成本费用。如果验证结果与您提供的序列有个别碱基不符,我们在征求您的意见后决定是否进行RACE 实验。
    ⑤ 由于mRNA 存在个体和组织差异或基因的序列特殊,RACE 的PCR 产物测序有时会有个别碱基是套峰或测不通的情况,对未测通部分可继续进行克隆测序,最终提供两个质粒的测序结果,碱基的准确性由客户自行判断。
    ⑥ 如果根据已知序列进行特异性扩增,得不到目的序列或为非目的基因的序列,将收取样品的验证费、Total RNA提取费和RACE耗材费,5′RACE 收取500 元/样品,3′RACE 收取200 元/样品,同一样品同时进行5′RACE 和3′RACE服务收取600 元/样品。

 
 3,提供结果
实验报告(包括PCR 产物照片、测序结果等)、扩增全片段测序报告一份(测序彩色波形图、测序方向图、碱基序列图)、引物,如果
产生克隆测序将提供测序用的质粒及细菌一份。
,4.操作流程:
如需详细资料可咨询技术部或至我们资料库下载

服务项目市场价格
载体构建基因合成2.9元/碱基
基因调取3000-5000(询价)
载体构建600-2000(询价)
基因转染800/基因;200/样
DNA提取服务60/样
基因甲基化检测 
RNA提取服务60/样
慢病毒包装(下调表达)8000/基因
RT-PCR80/基因;200/样
WB500/每张膜(根据具体蛋白,具体服务 还要分析)
FISH300/样;探针合成费用另计
流式检测细胞凋亡及周期(PI单染)200/样
TUNNEL检测细胞凋亡(定性)120/样
免疫荧光100/样
ELISA500/板(客户提供试剂盒)
蛋白表达服务原核表达,1mg蛋白8000元
真核表达,1mg蛋白15000元
细胞鉴定500/细胞
MTT300/板
免疫组化80/样
激光共聚焦200/样
电镜扫描电镜400/样; 透射电镜650/样
基因芯片5000/板
Bacmid构建及表达验证7500/基因
稳转细胞株构建10000/株
永生化细胞株构建18000/株
细胞膜电位分析500/样
细胞内ROS分析110/样
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