cDNA文库
cDNA文库是以特定的组织或细胞mRNA为模板，逆转录形成的互补DNA（cDNA）与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌形成重组DNA克隆群，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织或细胞的cDNA文库，具有组织或细胞特异性。

cDNA文库构建服务流程
1.mRNA的提纯,获得高质量的mRNA ;
2.cDNA第一条链的合成
3.cDNA第二条链的合成
4.双链cDNA的修饰
5.双链cDNA的分子克隆
6.cDNA文库的扩增
7.cDNA文库鉴定评价

注意事项:
1.RNA的提取(例如异硫*酸胍法,盐酸胍-有机溶剂法,热酚法等等,提取方法的选择主要根据不同的
样品而定)。
2.要构建一个高质量的 cDNA文库,获得高质量的mRNA是至关重要的,所以处理mRNA样品时必须仔
细小心。
3.由于RNA酶存在所有的生物中,并且能抵抗诸如煮沸这样的物理环境,因此建立一个无RNA酶的环境
对于制备优质RNA很重要。
4.文库构建要选择合适的载体,常规用的是λ噬菌体,这是因为λ DNA两端具有由12个核苷酸的粘性末
端，可用来构建柯斯质粒,这种质粒能容纳大片段的外源DNA。
5.胶回收前电泳槽,电泳板,梳子等都要用1%的HCI浸泡过夜。
6.胶回收时电压要稳定。

结果展示







实验周期及交付标准
1.实验周期：详谈
2.交付标准: 根据客户需要，提供包括载体MCS改造，启动子、增强子、筛选标志物等功能元件的改造等，使得经过改造了的载体满足试验研究的需求。

需确认的信息
1.样品需求量:组织(2~3克) , 细胞( 10^8)总RNA(200 ug) , mRNA(5 ~ 10 ug) ,请务必保持样品新
鲜, RNA无任何降解,以确保文库质量
2.请尽量提供物种基因组背景资料信息,如:基因组大小，基
因平均长度等等。