荧光定量PCR检测

    荧光定量PCR(Real-time qPCR)就是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。由于Real-time qPCR的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项重要技术，并成为基因表达差异和文章发表不可或缺的部分。real-time qPCR输出的数据不同于常规PCR电泳检测，很多没有做过real-time qPCR的研究者常常感到高深莫测，不知从何入手；甚至一些做过一些实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑。很多时候，尽管知晓qPCR的原理和基本操作，仍然浪费时间和精力，而得不到好的结果或对大量的数据不知所措。  
    华科鉴联基因科技提供的real-time qPCR技术服务，根据实验目的，设计实验方案（相对定量或绝对定量；SYBR Green I或Taqman探针方法），用完全按照符合国际标准（MIQE）的real-time qPCR试剂完成实验，提供符合文章发表的客观事实实验报告和原始数据。

服务要求

    需提供新鲜或保存完好的细胞（至少5×106）、组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料；或纯化好的总RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之间，完整性好）或总DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之间，完整性好）；或反转录好的cDNA不少于30μl（反转录的总RNA完整性好，纯度在1.9-2.1之间）； 同时提供待测基因序列或登录号。

报告内容

    荧光定量PCR实验报告包括总RNA(或DNA)浓度，电泳图片，扩增曲线，熔解曲线，Ct值以及数据统计分析（可选），实验报告以及剩余引物和模板（华科鉴联基因科技可保存1个月）

实验报告部分组成

 

服务编号服务项目内容说明价格周期 相对定量SYBR Green I染料法基础费用引物合成，扩增效率￥1000/基因2-3周※HKGENEQP01样品检测费用检测样品数＜10￥200/样品•基因HKGENEQP0210≤检测样品数≤20￥160/样品•基因HKGENEQP03检测样品数＞20￥120/样品•基因3-4周※ 相对定量探针法基础费用包含一条探针合成和标准曲线￥2600/基因4-5周※HKGENEQP04样品检测费用检测样品数＜10￥200/样品•基因HKGENEQP0510≤检测样品数≤20￥160/样品•基因HKGENEQP06检测样品数＞20￥120/样品•基因 绝对定量探针法基础费用标准品，标准曲线，和一条探针合成￥3500/基因4-5周※HKGENEQP07样品检测费用检测样品数＜10￥200/样品•基因HKGENEQP0810≤检测样品数≤20￥160/样品•基因HKGENEQP09检测样品数＞20￥120/样品•基因 绝对定量SYBR GreenI法基础费用标准品，标准曲线￥2000/基因3-4周※HKGENEQP10样品检测费用检测样品数＜10￥200/样品•基因HKGENEQP1110≤检测样品数≤20￥160/样品•基因HKGENEQP12检测样品数＞20￥120/样品•基因 miRNA SYBR Green I 相对定量基础费用引物合成，扩增效率￥1200/miRNA3-4周※HKGENEQP13样品检测费用检测样品数＜10￥300/样品•基因HKGENEQP14检测样品数≥20￥200/样品•基因HKGENEQP15引物设计合成设计引物，≤30碱基，2OD，PAGE级纯化￥4/碱基1周HKGENEQP16定量PCR标准品构建目的序列扩增，连接到载体，质粒拷贝数确定￥1000/基因1-2周荧光定量PCR价格里包括样品制备费用，如DNA，RNA提取，反转录等。※：一般情况下，3周-4左右可完成实验！若遇特殊原因，比如实验材料降解，需要重新提供样品或者总RNA需要重新提取；基因表达量较低，需要构建标准品等情况，周期会有所延长。