催化失活的Cas9(dCas9)连上转录抑制子,可以有效抑制基因组特定位点的转录,这一工具被称为CRISPRi。CRISPRi特别适合分析非编码RNA的具体功能。
pLVU9i-Puro第三代慢病毒载体,能够表达sgRNA和dCas9-KRAB,具有Puro抗性基因。KRAB是强转录抑制域。
pLVU9i-GFP是第三代慢病毒载体,能够表达sgRNA和dCas9-KRAB,具有EGFP荧光标记基因。KRAB是强转录抑制域。
CRISPRi 质粒构建流程
CRISPRi 质粒构建服务说明
1、客户提供基因名称和基因编号。
2、HYY提供:
(1)20μg CRISPRi质粒,浓度500ng/μL以上,超螺旋率95%以上;
(2)CRISPRi质粒的菌液500μL;
(3)CRISPRi质粒的测序峰图、酶切鉴定结果和序列;
(4)CRISPRi质粒的构建报告。
3、实验周期2~3周。