CRISPRi的原理
 

       催化失活的Cas9（dCas9）连上转录抑制子，可以有效抑制基因组特定位点的转录，这一工具被称为CRISPRi。CRISPRi特别适合分析非编码RNA的具体功能。
 

CRISPRi载体介绍

       pLVU9i-Puro第三代慢病毒载体，能够表达sgRNA和dCas9-KRAB，具有Puro抗性基因。KRAB是强转录抑制域。
 

 

       pLVU9i-GFP是第三代慢病毒载体，能够表达sgRNA和dCas9-KRAB，具有EGFP荧光标记基因。KRAB是强转录抑制域。
 

CRISPRi质粒构建流程


 

CRISPRi质粒构建服务说明

1、客户提供基因名称和基因编号。
2、HYY提供：
       （1）3×20μg CRISPRi质粒，浓度500ng/μL以上，超螺旋率95%以上；
       （2）3×500μL CRISPRi质粒的菌液；
       （3）CRISPRi质粒的测序图谱、酶切鉴定结果和序列；
       （4）CRISPRi质粒构建报告。
3、实验周期2～3周。