RNAi抑制基因表达的原理
 

       Dicer酶将dsRNA切割成19-21bp的双链RNA(siRNA)，每个片段的3’端都有2个碱基突出。siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)。ATP依赖的siRNA解双链激活RISC，激活的RISC通过碱基配对定位到靶标RNA转录本上，并在距离siRNA3’端12个碱基的位置切割靶标RNA，致使靶标基因的表达量降低。
       RNAi抑制载体一般表达shRNA，Dicer酶将shRNA切割成siRNA。
 

抑制表达载体介绍

 

pLV.I：具有copGFP（GFP的一种变体）荧光标记基因和Puro抗性基因。




pLV.I2：具有copGFP荧光标记基因和BSD抗性基因。




pLV.I3：具有mCherry（RFP的一种变体）荧光标记基因和Puro抗性基因。




pLV.I4：具有mCherry荧光标记基因和BSD抗性基因。



        以上对照质粒（抑制）均是第三代慢病毒质粒，可用于构建稳定细胞株，具有荧光标记基因和抗性基因，H1启动子驱动阴性shRNA大量表达。荧光标记基因便于检测抑制表达载体的转化效率、慢病毒滴度和慢病毒的转染效率。
 对照质粒（抑制）出货说明

 

1、20μg对照质粒（抑制），浓度500ng/μL以上，超螺旋率95%以上。
2、500μL对照质粒（抑制）的菌液。
3、对照质粒（抑制）的测序图谱、酶切鉴定结果和序列.
4、出货周期1～5天。