技术优势

（1）高效蛋白提取液进行高质量蛋白的提取，同时高效的蛋白酶抑制剂有效防止蛋白的降解及去磷酸化等作用；

（2）科维创生物拥有多年的Western Blot检测经验，为客户提供专业的技术服务。

（3）科维创生物为客户设置预实验，根据客户样品具体情况摸索最适上样量和抗体最适稀释度。

样品要求

客户需提供新鲜或正确保存的蛋白样品或者蛋白提取液，阳性对照样品（细胞或组织）， 检测目的蛋白的一抗（或由汉恒生物代购）。样品要求为：

1、细胞不少于5×10⁶个；

2、组织样品不少于50mg；

3、总蛋白浓度不低于 2μg/μl（至少50μl）。

实验内容

1、蛋白提取和定量（如果提供蛋白样品，则直接电泳预实验检测抗体特异性）；

2、SDS-PAGE 10-15% 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳；

3、转膜（PVDF膜）；

4、封闭（5%脱脂奶粉）；

5、一抗孵育（其中内参基因为Tubulin、GAPDH或Actin）；

6、二抗孵育（如果由于材料降解或一抗造成实验无法继续，则收取相关预实验费用）；

7、显色（ECL）；

8、曝光、洗片、分析。