（目标：抑制效率＞90％的基因沉默位点）

随着RNA干扰（RNAi）技术的不断深入，挑选zei佳的基因沉默位点（乃至RNA药物的靶点）所碰到的难题是用电脑软件设计出的siRNA往往不是zei佳的靶点。为了有效快捷的筛选出具有药物开发价值的siRNA，本公司开发了自主知识产权的全位点siRNA文库构建技术，能够从全长cDNA构建包含所有有效结合位点，长度分布于19 - 23bp的靶基因的siRNA分子库，亦可以模仿体内Dicer酶切割长度为21 - 23bp的分子库，适用于高通量功能基因及相关药物靶点筛选。

1.   构建流程示意图：

2. 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

构建流程：

2.1客户可选：

2.1.1提供靶基因的cDNA克隆。

2.1.2提供靶基因的相关信息 (基因的mRNA序列或Genbank Accession Number)，本公司进行全长基因合成。

也可在本公司的cDNA产品目录中，挑选靶基因cDNA克隆。

2.2进行siRNA文库构建，抽样测序验证。

2.3根据客户要求提供相应的siRNA文库克隆。

2.4将其连同抽样报告、产品说明书一起寄送到客户手中。

3．特色服务：

本公司还可以为客户提供如下特色服务：

3.1目的基因序列进行同源性分析，选择和其他基因无同源性区域的cDNA片段（高度保守区）进行全位点siRNA表达文库构建。

3.2根据客户的需求，对特定区域的cDNA片段进行全位点siRNA表达文库构建。

3.3分析相关文献，选择与特定基因功能研究密切相关的cDNA特定区域，进行高效的特异性的全位点siRNA表达文库构建。

3.4本公司还可以提供全位点siRNA表达文库筛选服务。

4. 构建的文库标准以及价格：

4.1全位点siRNA表达文库标准如下：

4.1.1构建文库的复性：＞3×基因长度。

（如1000bp的基因，siRNA位点单克隆数＞3000，以此类推。）

4.1.2构建文库重组率＞75%

4.2全位点siRNA表达文库价格。

基因片段长度	价格
≤300bp	￥20,000/文库
＞300bp	请询价

4.3全位点siRNA表达文库靶点筛选价格：

（RNAi沉默效果鉴定是运用实时荧光定量PCR）

靶点数目（个）	价格
≤60	￥20,000/30个位点
＞60	请询价

5.本公司实验性全位点siRNA文库资料共享

5.1HBV Polymerase Domain siRNA表达文库位点分布（随机抽样测序）

Polymerase Domain (984bp):

由此可见，本公司的全位点siRNA文库位点分布随机，代表性强，适用于siRNA药物靶点筛选的发现

5.2构建的Survivin基因全位点siRNA表达文库，文库, , 抽样基因沉默(qPCR)筛选结果：

该数据显示，本公司siRNA文库位点分布的随机性，筛选到沉默率达96%的zei佳靶点。