报告基因检测系统专门用来检测miRNA与靶基因的结合活性,该报告系统包含SV40启动子驱动的报告荧光(hRluc),其下游构建了靶基因3'UTR区域,通过对该荧光的监测,即可验证miRNA是否对该靶标是否有调控作用;另有一校正荧光(hluc)用于监测转染效率,靶标表达效率,可作为稳定内参。 | |
通过监测荧光素酶的活性变化,即可获得miRNA是否对靶基因3'-UTR产生调控作用,当miRNA与3'UTR靶标区域互补配对时,荧光素酶活力将显著降低;反之,当miRNA与报告基因(包含靶标区域突变)无法形成有效的互补配对时,荧光素酶活力将与对照无显著区别。 | |
已经构建了600多个人类重要基因的3'UTR报告载体,这些载体均经过精心设计,zei大限度地将靶基因的3'UTR区域构建完整,并通过系统测序鉴定。当您需要筛选与疾病相关的miRNA时,只须将疾病基因的3'UTR报告载体与miRNA文库共转,即可获得大量可靠的miRNA调控信息,高效,准确。 |