HILIC-1 色谱柱键合相为二醇基、HILIC-10 为脲基、Syncronis HILIC 为季铵和亚硫酸基团，这三款色谱柱代表了HILIC 色谱柱键合相的三种类型，即neutral、charged 和zwitterionic；根据HILIC 模式保留机理：1、水层和乙腈/水之间的分配作用；2、离子交换作用；3、氢键作用力。HILIC-10 和Syncronis HILIC 与离子性不突出的吗啡结构之间离子交换机理较弱，在PH5.0 时HILIC-1 的离子交换作用也较弱。对于保留起作用的是固定相键合相基团与吗啡氨基和羟基之间的氢键作用力，所以吗啡在键合相为二醇基的ILIC-1 色谱柱上保留最强。在HILIC-10 和SyncronisHILIC 上保留应该差不多，但本实验所用Syncronis HILIC 色谱柱柱体积较小，所以对于该款色谱柱采用了洗脱能力较乙腈/ 水（85 : 15）更弱的乙腈/ 水（90 : 10）。三款色谱柱在对于吗啡测定上表现出了不同的特点。吗啡在Acclaim HILIC-1 上出峰时间最晚，便于将复方药物中的吗啡与其他组分分开，更适合于应用于该化合物的分析，本方法可结合双三元SPE 测定复方甘草片中的吗啡方法使用，能够较快地得到分析结果，并且减少离子对试剂的使用，获得较长的色谱柱使用寿命。