在 AdvanceBio SEC 聚集体分析之后进行 Protein A 亲和 IgG 捕获--采用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案

"This Application Note describes the quantification of aggregates in biotherapeutic 本应用简报介绍了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对生物治 疗样品中聚集体的定量分析。Protein A 亲和捕获在第一维中进行，而体积排 阻色谱在第二维中进行。多中心切割用于将样品从第一维转移到第二维。这 项技术能够在一次分析中完成整个表征，无需进行馏分收集和多次进样。

摘要 

本应用简报介绍了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对生物治 疗样品中聚集体的定量分析。Protein A 亲和捕获在第一维中进行，而体积排 阻色谱在第二维中进行。多中心切割用于将样品从第一维转移到第二维。这 项技术能够在一次分析中完成整个表征，无需进行馏分收集和多次进样。

结论 

Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决 方案为在一个方法中测定 mAb 滴度 和聚集体提供了一种通用而高效的方 法，无需进行馏分收集和多重进样。 Agilent Bio-Monolith Protein A 亲和色谱 柱作为二维液相色谱工作流程的第一 维，有助于在滴度测定中实现 mAb 的 分析级纯化，并可在聚集体分析前作 为初始纯化步骤。Agilent AdvanceBio SEC 300 Å 色谱柱对聚集体与单体的分 离表现出优异的分离度，可在二维液 相色谱工作流程中作为第二维实现准 确的评估。

参考文献 

1. Vanhoenacker, G. 等，使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案 分析单克隆抗体酶解物，安捷伦科 技公司应用简报，出版号 5991-2880CHCN，2013 2. Lohaus, C. 等，用 Agilent BioMonolith Protein A 亲和 HPLC 色谱 柱快速测定人多克隆 IgG，安捷伦 科技公司应用简报，出版号 5989-9733CHCN，2008 3. Duong, P. T. 采用 Agilent Bio-Monolith Protein A 亲和色谱柱监测细胞培养 液中的单克隆抗体滴度，安捷伦科 技公司应用简报，出版号 5991-2990CHCN，2014