摘要：

在(-)-11-nor-9-羧基-△9-四氢大麻酚 代谢物(THCCOOH)的气相色谱-质谱分析中， 评估了 EmporeTM固相萃取柱（4215SD-C18） 的样品制备。固相萃取柱性能由测定的回收 率决定。回收率范围在 78.7-110.1%。标准 曲线线性范围在 0.15μg/mL~3.0μg/mL 时， 相关系数 R2=0.9998。

关键词： 四氢大麻酚，THCCOOH，外标法，GC-MS 

前言：

美国 CDS 公司膜式固相萃取 (SPE)技术， 以其有机溶剂消耗少、结果重现性高、样品 制备的通量高、提取物更清洁，可减少 GC 系统的污染以及自动化提取等优势[1]，广泛 应用于药物检测领域，尤其成为临床和法医 毒理学实验室中样品制备的首选技术[2,3]。 本实验使用美国 CDS 公司膜式固相萃取柱 （EmporeTM，4215SD-C18）提取尿液中△ 9-四氢大麻酚（THC，大麻）代谢物（-） 11-nor-9- 羧 基 - △ 9- 四 氢 大 麻 酚 (THCCOOH)，并以 GC-MS 分析定量。 

1，实验过程

1.1 仪器与试剂 

所有试剂均为分析纯或更高。 THCCOOH（100.0±0.6 μg/mL）和 MSTFA + 1% TMCS 硅烷化试剂，均购自西格玛奥德里 奇（上海）贸易有限公司； 

人工尿液（PH：5.7-500mL），购自福州飞 净生物科技有限公司； 

乙酸乙酯（色谱纯），购自赛默飞世尔科技（中 国）有限公司； 

甲醇（色谱纯），购自赛默飞世尔科技（中国） 有限公司； 

正己烷（色谱纯），购自赛默飞世尔科技（中 国）有限公司；

EmporeTM 膜式固相萃取柱：4215SD-C18， 购自美国 CDS 公司； 

气质联用仪：7890B-5977B 安捷伦气质联用 仪，Agilent 公司。 

1.2 工作液配制 

THCCOOH 标准使用溶液：0.1 μg/mL，溶 剂体系为甲醇；

1.3 实验部分

1.3.1 样品制备 

取 12 个 15mL 离心管，分别装入 3mL 尿液样品，再加入不同体积的 THCCOOH 标 准使用液（加标量分别为 3ng、15ng、30ng、 60ng、150ng、300ng），每个标点进行平行 两次制备。然后加入 300μL 氢氧化钾溶液 （10mol/L）,在 60℃水浴环境下水解 15min 取出后冷却至室温，再以冰醋酸调节 pH 值 到 4.0~4.5。 EmporeTM固相萃取柱（C18, 7mm/3mL） 预先用 150μL 甲醇进行活化，之后进行上样 （在重力作用下使样品自然流下），上样结 束后用 750μL 甲醇-水溶液（50：50）淋洗 萃取柱，在 690mmHg 真空状态下干燥 5min， 最后用 800μL 正己烷-乙酸乙酯溶液（75： 25）进行洗脱。

1.3.2 净化与浓缩 

洗脱液经 40℃氮吹至干，然后加入 100μL 衍生试剂（MSTFA+1%TMCS），在 60℃ 水浴条件下衍生 20min，转移至样品瓶待 GC-MS 分析。

1.3.3 标准曲线配制 

取 6 个 20mL 样品瓶，分别加入不同体 积 THCCOOH 标 准 使 用 溶 液 ， 加 入 THCCOOH 的质量分别为 3ng、15ng、30ng、 60ng、150ng、300ng，参照与加标样品制 备同等浓缩、衍生条件进行前处理，待 GC-MS 分析。 

1.3.4 GC-MS 分析 

进样口温度：290℃；进样模式：不分 流进样；流速：1.0mL/min； 柱温：100℃保持 1min，然后以 30℃ /min 的速度升至 300℃，保持 5min。 表