简介 

⽣物制药⾏业⽬前处于开发阶段的⽣物治疗药物中，治疗性单克隆抗体(mAb)仍然占极⼤多数。在mAb的药物研 发⽣命周期中，通常会对其完整结构和亚基进⾏质谱分析，旨在确认序列完整性、监测产品变化以及鉴定产品。⽣ 物制药⾏业亟需⼀种简单通⽤的平台⽅法，能够对理化性质各异的mAb进⾏质量数测量，从⽽提⾼分析效率，尤 其是药品的发现和早期开发阶段 — 这些时期通常需要⾼通量筛选多种mAb结构。 

体积排阻⾊谱(SEC)是⼀种等度蛋⽩分离⽅法，选择性主要取决于蛋⽩质的平均斯托克斯半径，与蛋⽩质的分⼦量 (MW)对数有关。与反相(RP)⾊谱法相⽐，SEC⽅法由于分析物回收率不受较⾼柱温影响且产品峰通常在可预测的 位置洗脱（与分⼦的等电点(pI)和疏⽔性⽆关），因此更为通⽤。我们使⽤含30%⼄腈、0.1%三氟⼄酸(TFA)、 0.1%甲酸(FA)的流动相，开发了⼀种蛋⽩质变性SEC⽅法，充分发挥体积排阻分离功能的优势，分离还原抗体轻 链(LC)和重链(HC)亚基。将SEC分离结果传输到BioAccord系统，以获取还原⽚段的UV和质谱数据。该⽅法为 mAb分析提供了稳健的⼯作流程，能够⾼度兼容多种缓冲液和配⽅助剂，可⽤作平台分析⽅法。