介绍 

对环境中未经检验的化学品日益普遍的关注 已经产生了开发可靠和有效的筛选工具以识 别可能影响人类健康的1，特别是神经系统 发育的化学物质的迫切需求。 

我们评估了一种神经突向外生长的测定方 法，通过筛选和表征所选化合物的活性，评 估其是否可能对发育中的神经系统产生不利 影响。选择该测定法是因为其在神经系统发 育关键过程的模型具有一定相关性，特别是 神经元会通过延伸其神经突以形成完整的神 经网络2。破坏这一过程可能会对人类和啮 齿动物产生不利影响，因此研究表明，未成 熟、发育中和成熟的神经突是化学毒性的靶标3。

 虽然神经突向外生长测定主要用于评估发育 神经毒性，但也可用于评估通过检测神经突 收缩的神经变性。此外，该测定还有可能与 评估成年神经元中的神经可塑性相关4。对 于筛选测定，总神经突向外生长通常是指标 报告中最常见的度量标准1,5。利用自动成像 还能够对其他特征进行多参数评估，例如总 分支数和总过程数，以评估化合物可抑制神 经突向外生长的不同方式6,7。 

材料 

• ImageXpress Nano 自动成像系统，配备 CellReporterXpress 自动图像采集和 分析软件 (Molecular Devices) 

• iCell® 神经元 (Cellular Dynamics International) 

• Poly-d-赖氨酸预包被 384 孔板 (Corning Life Sciences) 

• 层粘连蛋白 (Sigma- Aldrich) 

• 多聚甲醛 (Sigma-Aldrich) 

• 胎牛血清 (Sigma-Aldrich) 

• β-微管蛋白 III APPLICATION NOTE (TUJ-1) (BD Biosciences) 

• Hoescht (ThermoFisher Scientific) 

• 抗 β-微管蛋白抗体 (BD Biosciences) 

• Calcein AM (ThermoFisher Scientifiic)

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