近年来，在体外大规模培养肿瘤细胞来模拟体内病理环境的技术已有了极大进展。 如果将培养的肿瘤细胞加入圆底的微孔中，这些富集的细胞就会形成离散的球 体。这些离散的球体同时包含了暴露在表面的和深埋在内部的细胞，增殖的和非增殖的细胞，外面的富氧层和内部的缺氧中心。基于上述特点，与传统的二维细胞培养方法相比，这种球体可以更好的模拟肿瘤的行为特点。而这种三维肿瘤细胞球体模型已经被成功的应用于肿瘤治疗方法的筛选中。而建立更成熟健全的球体实验目前还面临一些挑战：

 • 定位每个微孔中的球体使其在单视野中成像

 • 优化染色处理过程在保证染料渗透性的同时，避免干扰球体的定位

 • 获得整个3D结构的清晰图像，尽量减少成像平面外背景信号和散焦的影响

 • 可以迅速的分析图像得到有意义的结果并同时绘制出图表