Automated cloning using Takara Bio In-Fusion® Snap Assembly on the OT-2

应用领域:分子生物学,蛋白/抗体/蛋白质组,基因/基因组/测序,其他生命科学,合成生物学

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方案摘要

高通量克隆方法的发展使得能够快速组装数百个基因,以用于基因组学和合成生物学研究。基于PCR、无需限制酶的克隆方法已经取代了限制酶依赖的连接或TA克隆等耗时的克隆方法,这些方法受载体和插入片段序列的限制。基于PCR、无需限制酶的克隆方法可以在任何位置和任何序列中插入任何DNA片段,已经成为首选的克隆方法。

克隆工作流程的自动化可以提高通量和减少实验变异,但只有少数克隆试剂被证明与自动化平台兼容。我们进行了一项研究,评估在Opentrons OT-2平台上使用In-Fusion Snap Assembly试剂盒实现快速、简单克隆工作流程的自动化。In-Fusion克隆方法无需限制酶,具有方向性和高效率(>95%),具有极低的背景,且操作简单。我们成功地在OT-2平台上实现了In-Fusion Snap Assembly方案的自动化。

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