如何准确评价HTRF细胞因子检测与其细胞活性变化的关系

应用领域:细胞生物学

检测样品:HTRF细胞因子

检测项目:细胞活性

方案摘要

已知促炎和抗炎细胞因子在自身免疫、炎 症调节和传染病中发挥着重要的作用。同 时在代谢紊乱、肿瘤学也起着重要作用, 尤其是抗肿瘤免疫应答。Cisbio 公司提供 各种细胞因子和趋化因子定量的均相时间 分辨荧光 (HTRF) 检测试剂盒。HTRF 技术 非常适合监测细胞因子和趋化因子在细胞 实验中的释放,特别是像外周血单个核细 胞 (PBMC) 这样的物理模型。通常,细胞 因子释放的调节依赖于使用药物化合物来 诱导或抑制它们的分泌。为了进一步了解 这些药物的作用机制,需要我们仔细分析 它们的作用,特别是对细胞活力的影响。 本应用介绍了如何使用 SpectraMax i3x 多 功能微孔板读板机和 SpectraMax Minimax  300 细胞成像仪如何对细胞因子分泌和细 胞活性进行分析。该方法可以逐孔/逐细 胞进行 HTRF 和细胞活性检测,并通过细 胞形态来确定其质量。本文将介绍 (i) 如何 经过处理的 PBMC 中诱导细胞因子分泌,  (ii) 如何通过HTRF方法检测细胞因子,(iii)  如何用 Molecular Devices 公司的 EarlyTox  细胞完整性检测试剂盒评估 PBMC 活性,  (iv) 何将细胞因子浓度转化成 PBMC 活性。

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