使用AFS检测单分子水平的蛋白去折叠过程

应用领域:分子生物学,蛋白/抗体/蛋白质组,其他生命科学

检测样品:踝蛋白

检测项目:踝蛋白去折叠过程的研究

参考标准:Sitters, G., Kamsma, D., Thalhammer, G., Ritsch-Marte, M., Peterman, E.J.G. & Wuite, G.J.L. Acoustic Force spectroscopy. Nature Methods 12, 47-50 (2015).

方案摘要

AFS设备使用压电元件共振激发平面声阱穿过微流控芯片。共振波对与周围介质密度不同的微球施力,每个生物分子被单独地由微球拉伸(图1)。仪器可以实时并行操控视野范围内数以百计的微球,获得大量的数据以研究每个生物分子的随机与异质行为(图2)。在Yan Jie(NUS)的实验室的这项试点研究中,我们首次展示了AFS如何对蛋白施力并操控。实验对踝蛋白施力引发(去)折叠同时以高度记录蛋白的拉伸。踝蛋白属于机械敏感性大分子,在调控蛋白粘附于胞外基质中起作用。踝蛋白是细胞代谢过程和信号通路中的关键,并能够在力的作用下改变构象,在单分子生物物理学中备受关注。 

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