采用多中心切割 (MHC) 二维液相色谱 (2D-LC) 从 MS 不兼容的 USP 方法中自动脱盐。

摘要 

治疗性多肽和蛋白质的表征及杂质分析需要联合使用色谱分离和质量选择检 测。然而，多肽和蛋白质的色谱分离方法通常使用 MS 不兼容的流动相。本 应用简报采用多中心切割 (MHC) 二维液相色谱 (2D-LC) 作为质量选择检测 的自动脱盐工具。在第一维中，使用 MS 不兼容的流动相根据 USP 39 分析 多肽胰高血糖素。然后在第二维中进行自动脱盐和质量选择检测。

结论 

使用 Agilent InfinityLab 二维液相色 谱解决方案的多中心切割二维液相色 谱 (2D-LC) 可作为有效的脱盐工具， 实现使用 MS 不兼容流动相的色谱方 法与质谱检测的在线联用。根据 USP 39，在流动相中使用磷酸钾缓冲液对 多肽胰高血糖素进行分析。将此 MS 不兼容的色谱方法在第二维中脱盐后 与质量选择检测联用。未检测到加合 物，表明使用 Agilent AdvanceBio 脱 盐反相小柱可实现有效脱盐。获得了 目标峰（例如胰高血糖素峰和胰高血 糖素脱酰胺基化产生的峰）的质量数 信息。

参考文献

1. Luo, H.; et al. 2D-LC as an on-line desalting tool allowing peptide identification directly from MS unfriendly HPLC methods.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 2017, 137, 139-145 

2. Petersson, P.; Haselmann, K.; Buckenmaier, S. Multiple heart-cutting two-dimensional liquid chromatography mass spectrometry: Towards real time determination of related impurities of bio-pharmaceuticals in salt based separation methods. Journal of Chromatography A 2016, 1468, 95-101 

3. Suresh, Babu C. V.; Ravindra, G. 用 于 2D-LC/MS mAb 分析中在线脱 盐的 Agilent AdvanceBio 脱盐反相 小柱，安捷伦科技公司应用简报， 出版号 5991-7066CHCN，2016 

4. Joshi, A. B.; Rus, E.; Kirsch, L. E. The degradation pathways of glucagon in acidic solutions. International Journal of Pharmaceutics 2000, 203, 115-125 

5. “Glucagon” Official Monographs USP 2016 39, December 1