使用 UHPLC 和荧光检测对单克隆抗体 和其他糖蛋白的 N-糖链进行分析——配备 Agilent AdvanceBio 糖谱分析色谱柱的 Agilent 1290 Infinity 二元液相色谱系统

应用领域:

检测样品:单克隆抗体和其他糖蛋白

检测项目:N-糖链

方案摘要

本文描述了使用配备 Agilent 1260 Infinity 荧光检测器和 Agilent 6530 精确质量 Q-TOF LC/MS 的 Agilent 1290 Infinity 二元液相色谱系统,通过亲水相互作用色谱 (HILLC) 对 N-连接糖链的分析。使用 PNGase F 对单克隆抗体 (mAb) 及两种其他糖蛋白(胎球蛋白 和卵清蛋白)进行酶解后,再利用 2-氨基苯甲酰胺 (2-AB) 对释放所得的糖链进行衍生化 反应。Agilent AdvanceBio 糖谱分析色谱柱具有的出色分离度使我们可以对 mAb 样品 中所有主要的 N-糖链进行检测和鉴定。此外,从胎球蛋白和卵清蛋白中释放出的多种高 度复杂的 N-糖链可以得到良好分离。

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