肽谱分析是表征生物治疗性蛋白质的一种常用分析技术。首先用一种或两种蛋 白酶将蛋白质酶解成小分子肽。肽混合物通常采用反相色谱法分离，然后通过 紫外或质谱检测器进行检测。质谱可以提供肽的质量数据，从而大大扩充肽谱 分析的信息含量。由于增加了质量分离模式，可以轻松鉴定出共流出的多肽， 同时也可以大幅缩短梯度时长。此外，串联质谱可以将肽碎裂为更小的片段， 并为肽的氨基酸序列以及糖基化、磷酸化、氧化和脱酰氨基化等翻译后修饰 (PTM) 提供证据。 本应用简报介绍了如何使用新型表面多孔肽谱分析色谱柱配合 Agilent 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS 系统对一种 IgG (1) 治疗性单克隆抗体 (mAb) 进行肽谱分析。 结合 MS/MS 分析，肽谱分析色谱柱独特的分离能力可以最大限度提高分离度和 效率，可确保实现可靠灵敏的肽鉴定，而且只需 15 分钟的运行即可实现高序列 覆盖。6550 iFunnel Q-TOF LC/MS 系统可为肽鉴定提供出色的质量准确度和灵敏 度，而 MS/MS 功能则有助于更可靠地确定被修饰肽的鉴定结果。此外，本文还 探讨了通过 IgG (1) 肽谱分析梯度和 LC/MS/MS 参数的优化，实现稳定、快速、 可靠的 mAb 肽谱分析。