反相色谱 (RP) 肽图分析是生物治疗药物分析中最主要的技术，可为生物制药产品提供全 面的表征。当与质谱仪 (MS) 联用时，能实现对蛋白质及其变异体的鉴定，确定翻译后修 饰 (PTM) 及其位点，并确认蛋白质序列。然而，由于蛋白质裂解物固有的复杂性，使得 利用色谱进行肽图分析非常具有挑战性。因此，许多组织都致力于开发稳定、可靠的肽 图分析方法。通常而言，肽图分析受到灵敏度低、峰形差及需要较长分离时间来达到所 需分离度的影响。 近年来，人们应用超高效液相色谱 (UHPLC) 以克服这些挑战，与常规 HPLC 相比， UHPLC 经证实具有超高分离度、更高的灵敏度，且可大大缩短分析时间。UHPLC 技术 可更详尽地表征蛋白生物治疗药物，其通过加快流速、缩小粒径及缩短柱长，可在更短 的分析时间内实现更高的分离性能。但是，这种类型的分离对压力要求越来越高，不能 在常规的 400 和 600 bar 高效液相色谱仪上进行操作，严重地限制了其应用范围。