一种用于磷酸肽鉴定和磷酸化位点定位的新型自动化、高选择性磷酸肽富集方法

应用领域:蛋白/抗体/蛋白质组,多组学/蛋白质组/代谢组/脂质组

检测样品:“磷酸肽”样品

检测项目:肽段

方案摘要

针对 HUPO 磷酸肽挑战赛,使用 AgilentAssayMAP Bravo 平台和 LC/Q-TOF  系统进行自动化磷酸肽富集以实现定性和定量分析。

执行 CID 肽鉴定实验,在“磷酸肽”样品中鉴定出 437 种特有肽段,其中包括94 种磷酸肽。鉴定出 HUPO 序列表中的所有 89  种非磷酸肽。ECD 实验基于 89个非磷酸肽序列确定了 96 种磷酸肽的磷酸化位点。还将序列表中未列出的其余肽返回给 HUPO。

在富集的“磷酸肽-酵母”样品中,鉴定出 287 中特有肽段,其中包括 264 种特有磷酸肽。富集的总体选择性约为  92.0%。此外,从富集的“磷酸肽-酵母”样品中仍鉴定出加入酵母中 96 种磷酸肽中的95  种。与开展本研究中的其他实验室相比,安捷伦从富集样品中回收的磷酸肽数量最多。    

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