问:刚买了南京建成的LDH试剂盒,打算用酶标仪检测细胞的LDH释放率,但是有几个问题比较困惑?1、用96孔板种细胞,密度应该种多大?2、细胞培养液应该加多少?用1640会影响OD值的测定吗?是否应加上单独培养液作为对照呢?3、测上清液的LDH时,应该取多少作为样本呢?4、超声破碎细胞时,需要破碎多长时间?5、因用96孔板检测,可否将说明书中的液体用量减到1/10?这样会对结果有影响吗?答:什么细胞?如果细胞分裂速度较慢,我建议1x105-2x105
问:我打算检测线粒体膜电位,大鼠肺移植后,如何分离肺泡上皮细胞呢?答:步骤如下:1、取得完全无血液残留的肺脏:实验前将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏
问:我提取的是贴壁细胞蛋白,过程是1、PBS洗2遍后,细胞刮刮下后离心(没有消化,这样可以吗?)2、去上清,每管加入了加了188微升的裂解液和12微升的PMSF(是不是太多了?)3、离心后,吸取140微升上清到新EP管中
问:我现在在养细胞,然后收细胞抽蛋白以及提RNA用,我想先多收点细胞冻着
问:我要分离细胞器,先要破碎细胞