新买的氨基柱，为啥没有旧柱子好用呢？

在色谱分析过程中大家可能发现，对某些化合物而言，当使用旧色谱柱时峰形和分离度都比较好，换新柱后会出现保留时间延长或拖尾问题。所谓“柱子不一定新的好！越用越好用！”产生这种现象的原因是：新色谱柱填料中有很多活性位点，对于您的样品来说，柱子和样品之间需要一段“磨合期”。

新柱与样品之间的“磨合期”

一般解决方案：打底进样，将新色谱柱填料中过多的活性位点占用。

具体操作：可连续进样5针低浓度样品，一针接一针进样，不必等样品峰出完再进下一针；或者直接进一针或几针高浓度样品，等待出峰稳定之后再进行分析检测。

这种操作方法，我们且称之为“新柱的饱和钝化”。但这并不是万能的处理方式。比如：氨基柱。

氨基柱常用于糖类分析检测，在新柱使用初期同样会出现峰保留增强和峰拖尾的问题，对分析的准确性、重现性存在较大影响。而因分析物性质影响，打底进样难以达到吸附平衡，对活性位点的占位屏蔽作用不明显，分析物仍易拖尾，如下图：

月旭Ultimate® HILIC NH2，5μm

新柱对某糖分析谱图-处理前

对此我们考虑三乙胺常用作扫尾剂以屏蔽填料中残余硅醇基对分析物产生的次级吸附作用，氨丙基键合相新色谱柱也可使用TEA进行预处理。以0.5%三乙胺（用磷酸调pH至2.5~3.0）：乙腈（30：70）为流动相，0.5~1mL/min过渡冲柱30~60min，再使用分析所需流动相充分平衡后进样。在此条件下，三乙胺极易与残余硅醇基形成氢键，起到占位屏蔽作用且能够快速达到吸附平衡，解决了新色谱柱对分析物因次级吸附造成的峰保留增强与峰拖尾问题。色谱柱处理后谱图如下：

月旭Ultimate® HILIC NH2，5μm

新柱对某糖分析谱图-处理后

月旭Ultimate® XB-NH2，3μm

新柱对某糖分析谱图-处理后

领域：其他

标签：氨基柱