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       近年来，用于重组蛋白药物生产的主要细胞为哺乳动物细胞，因为它们具有类似人类细胞的糖基化修饰方式，HEK293 衍生的细胞系通常用于瞬时蛋白质生产，已成为一种广泛应用于生产重组蛋白的哺乳动物异源表达系统。

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什么是HEK93

       HEK293细胞，又叫人胚胎肾细胞293，是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系，具有转染效率高，易于培养等特点。因此成为了广大研究者研究基因功能的一个强大工具。

（HEK293图册）

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HEK293细胞系概览

（注：以下细胞介绍中，HEK293细胞简称为293细胞）

293T细胞：293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株，即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增，从而促进表达载体的扩增，促进蛋白的表达。293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产，还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产，如腺病毒及其他哺乳动物病毒。

 

293T/17细胞：293T细胞中共转染入pBND 和 pZAP 质粒，获得的具有G418耐受的细胞系即为293T/17细胞系。该细胞系在保有293T细胞的优良性能之外，还具有高转染性的特点。

 

293H细胞：293H细胞则指的是将293细胞驯化后得到的能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。另外，该细胞系贴附力好，而被用于噬菌斑检测等应用。

 

293E细胞：293E细胞指的是在293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系，该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV复制起点（oriP）的重组表达质粒，能够在H293E细胞中复制，并实现蛋白的高效表达。

293F细胞：293F细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系。293FT细胞是在293F细胞系中插入pCMV- SPORT6-TAg.Neo质粒的转化细胞系，能够快速增殖，易转染，其能够用于慢病毒的生产。

293S细胞：293S细胞则指的被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。

293SGGD细胞：293SGGD细胞系则指的是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系，其主要用于糖基化工程研究中。

(HEK293概述图)

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HEK293细胞表达系统的优势

1) 转染效率高；

2) 2) 可悬浮培养用于大规模表达；

3) 表达蛋白结构最接近其在人体内构象；

4) HEK293细胞在培养体系中能够快速增长，高密度培养。

5) HEK293细胞与神经元细胞一样，对外界微环境较为敏感，利用这一特点，可用于药物发现及细胞毒性测试。

       在HKE293细胞系培养的整个过程中，都需要对细胞进行浓度和活率检测，牛顿光学CytoCubeAuto全自动便携高通量细胞计数仪是一款基于图像法检测的细胞计数仪，具有优秀的光路系统和图像识别系统，能够有效的区分细胞碎片与杂质的干扰，得到非常稳定可靠的结果。

（CutoCubeAuto明场与台盼蓝对HEK293细胞圈出情况）

参考文献：Lin Y C, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.

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领域：细胞生物学