RPC强洗脱混合溶剂比建模

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1. 概述

本技术说明文件说明了构建RPC强洗脱二元混合比模型和三元混合比模型所需要的实验设计及数据处理部分的注意事项。本指南将涵盖二元溶剂比优化和三元溶剂比优化所需要的实验次数和具体操作说明。

2. 介绍

2.1

二元溶剂比优化

对于RPC二元溶剂比优化(如甲醇，乙腈混合)，至少提供3针不同的甲醇和乙腈的比例的实验数据，3针设计可以都是甲醇和乙腈混合的实验，也可以用纯溶剂做其中的一组数据。LC-Simulator会根据混合比实验设计，将实验设计的两个端点对应的溶剂表示为S1和S2，如图一所示。蓝点对应于LC-Simulator左上角显示的主溶剂比。

Fig. 1 二元混合比模型界面

2.2

三元溶剂配比优化模型

对于三种不同强洗脱的优化，可以想象成溶剂三角形。如下图二所示， S1,S2和S3分别为三种纯的强洗脱溶剂，在构建三元混合比模型时，需要在三角形的三条边上再选取3个两两混合的条件，以构建分离度图。其中三条边上的取点可以是位于边线上的任意比例，不必为中心点。6针为最少实验量，可以增加三角形中心实验点以确保模型的准确性。

图二，LC-Simulator 2023.2.3版本之前的三元溶剂配比研究，纯溶剂举例

由于S1,S2,S3的纯溶剂的保留能力不同，带来选择性的判定困难，因此软件允许S1,S2,S3 为混合溶剂，最常见的RPC策略为S1(甲醇)，S2(乙腈)，S3(55%THF)。此时构建出的模型不能外延，即无法预测高于55%的THF的保留和分离情况。其设计如图三所示。

图三，LC-Simulator 2023.2.3版本之前的三元溶剂配比研究，三角形一角为非纯溶剂举例

由于优化起点的特殊性，研究者常见会有如图四所示的实验方案。原强洗脱从乙腈为出发点，最多混入50%的甲醇或异丙醇，即取溶剂三角形的一角做研究。此时构建的模型将局限于黄色的范围之内。黄色设计空间之外的白色部分在实际模型中不可见。

图四，LC-Simulator 2023.2.3版本之前的三元溶剂配比研究，取溶剂三角型一角研究

根据用户提供的实验设计数据，软件会自动将三角形的三个顶点定义为S1,S2和S3，并在左侧面板的下部显示S1,S2和S3具体的强洗脱组成。

LC-Simulator 2023.2.3之后的版本增加了新的功能，允许大的溶剂三角形中截取小的三角形，黄色空间的取点建立模型后可以预测从黄色区域（设计空间）外延到白色区域。如图五所示

图5 LC-Simulator 2023.2.3版本之后的三元溶剂配比研究，取溶剂三角型一角研究，模型可以外延

3. 数据处理时的注意事项

对于AutoChrom offline用户，LC-Simulator只支持二元泵的实验参数的读取。如果是通过在线混合方式采集的实验数据，在Spectrus Processor中进行数据参数录入时，必须转化为二元泵，具体做法如下所示。如果是AutoChrom online用户，并通过AutoChrom界面构建模型，软件会自动进行转化。

1.调出HPLC Parameters窗口，

2. 右键单击选择Add Phase 。

3.在Phase B下的Solvent Component 空白处右键单击增加新的行。

4. 通过下拉菜单指定所需要的溶剂，并在%处输入具体的比例，确保混合后的所有溶剂占比相加为100%。

4. 小结

本文概述了使用ACD AutoChrom 进行反相强洗脱流动相混合研究的实验设计思路和方法，也介绍了新版本软件的外延性预测拓展的能力。

如有相关技术问题，请联络support-china@acdlabs.com 获取技术支持服务。

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