本文建立了川牛膝中杯苋甾酮的HPLC测定方法。结果表明，采用

色谱柱Shim-pack GISS C18 

(4.6×250 mm，5 μm )分析杯苋甾酮，杯苋甾酮峰的理论塔板数为36965，杯苋甾酮与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为川牛膝中杯苋甾酮的检测提供参考。

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实验部分

1.1 实验仪器及耗材

色谱柱：

Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-30061-07)

纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱 + 取水器）；

SHIMSEN Disc HPPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；

LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

Nichipet Air移液枪：

Nichipet Air 0.5-10 μL（P/N：00-NAR-10）；

Nichipet Air 10-100 μL（P/N：00-NAR-100）；

Nichipet Air 100-1000 μL（P/N：00-NAR-1000）；

Nichipet Air 1000-10000 μL（P/N：00-NAR-10000）。

1.2 对照品溶液的制备

取杯苋甾酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1mL含 25μg的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20 mL，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.4 分析条件

色谱柱：Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm ) 

柱温：30℃

检测波长：243 nm

流速：1.0 mL/min

进样量：10 μL

流动相：甲醇—水

02

实验结果

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：

对照品溶液

供试品溶液

03

结论

按照《中国药典》中色谱条件，建立了川牛膝中杯苋甾酮的HPLC 测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm，5 μm )分析杯苋甾酮，杯苋甾酮峰的理论塔板数为36965， 杯苋甾酮与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为川牛膝中杯苋甾酮的检测提供参考。