在抗体药物的血药浓度定量分析中，使用配体结合的传统方法进行测定时，必须针对目标药物制备具有高度特异性和亲和性的检测抗体，并且确立分析方法也需要耗费大量的时间和费用。而使用 LC/MS/MS 进行分析，由于不需要制备抗体，不仅大幅度缩短了分析方法的创建时间，还可以降低成本。

本文向您介绍使用Skyline 软件和岛津LCMS-8050/8060 创建MRM方法，对生物样品中的单克隆抗体进行特异性检测的分析示例。 免疫球蛋白的基本结构是由分子量约 23,000Da 的轻链和分子量 50,000～70,000Da 的重链构成，不同物种之间氨基酸序列保持一致称为保守区域，各抗体分子中不同氨基酸序列部分被称为可变区。在可变区中，规定抗原识别特异性的区域被称为互补决定区（CDRs）。该区域在抗体分子间的氨基酸序列存在多样性。免疫球蛋白中，重链和轻链分别含有 3 处 CDRs，为了将血液样品中的抗体药物等单克隆抗体与内源性抗体区分开定量，必须选择性地检测 CDRs。使用创建的分析方法测定经胰酶酶解的单克隆抗体。测定后数据文件将直接导入到 Skyline，并自动选择高灵敏度的肽碎片和定量灵敏度高的离子对，由此筛选最佳定量分析条件。因此，岛津LCMS-8050/8060 和 Skyline 软件的组合使用，缩短定量分析方法的创建时间。

 

免疫球蛋白的结构和互补性决定区（CDRs）

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领域：蛋白/抗体/蛋白质组,基因/基因组/测序,临床血液与检验学

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