导

读

● ●

截至5月26日，累计 23 个未流行猴痘病毒国家向世卫组织报告实验室确诊病例257例，疑似病例约120例，没有死亡报告。流行病学调查正在进行中，绝大多数报告的猴痘确诊病例都无流行地区旅居史，猴痘确诊和疑似病例的识别是非典型的。

猴痘病毒实验室检测

的意义

目前，世界多个地区爆发了多国猴痘疫情，波及范围尚不明确。在这种情况下，开展实验室检测的意义在于能够及时地确认已感染病例，尽早打破传播链，阻止疫情爆发。

实验室检测方法有哪些？

• 荧光定量PCR（qPCR）

• NGS二代测序

• ELISA

汇像三种检测方案

快速锁定确诊者，确定病毒进化枝

1

高通量核酸检测自动化解决方案

根据《世界卫生组织猴痘病毒实验室检测指南》，一般使用qPCR或常规PCR等核酸扩增检测方法 (NAAT)对猴痘感染的疑似病例样本进行实验室检测。核酸检测的结果一般显示为正痘病毒 (OPXV) 或猴痘病毒（MPXV）的特定序列。

同时，指南建议，因其传染性，对来自实验室中疑似、可能或确诊猴痘病例的标本进行所有处理，要采取控制风险的措施。自动化的检测方案能够降低实验员接触病毒的可能性，保护疫情环境下尤显珍贵的医疗检测资源。

汇像方案

可适配市面上普通的核酸提取试剂盒和目前已获欧盟CE认证的“猴痘病毒核酸检测试剂盒”等。

猴痘病毒的提取和检测全流程

汇像也有自主研发的相关仪器，可与自动化系统无缝连接：

应用案例

在新冠病毒横行期间，汇像高通量核酸检测自动化解决方案助力大规模核酸筛查，降低疾控人员及医护人员的工作强度和压力，实现单样日检测量万人份的需求，同时可兼容混样检测（5：1，10：1，20：1）等。

高通量核酸检测自动化解决方案：Harmony G10000

Harmony G10000

1.全流程自动化，高通量检测无忧：

    

   从样本核酸提取、PCR体系构建到qPCR检测全流程自动化

2.信息智能化：

   

   汇像Superlab中控系统的支持，对接样本信息，智能反馈检测结果

    开发了汇像核酸检测自动化数据对接系统，协助检测人员处理每日百万、  别的核酸数据

3.设置多重防护：

    紫外消毒和HEAP高效过滤，有效保护人工与样本安全

4.配置灵活开放：

    可与市面上常见耗材、试剂盒、检测仪器兼容

2

NGS二代测序自动化解决方案

指南提到，除了 NAAT，测序方法能够确定病毒进化枝、了解流行病学。因此WHO强烈鼓励各国在可用和可公开访问的数据库中共享 MPXV 基因序列数据。

荧光定量PCR的核酸检测对于猴痘病毒的大规模筛查以及确诊判定，有巨大优势，但也存在一些缺点：

在病毒感染的期，需对病毒的全基因组序列进行全部解码，解码完成方可应用qPCR进行筛查工作；

后期病毒在传染过程中，开始出现新变异，此时基于荧光定量PCR的筛查可能就会存在漏检的情况。

因此在进行猴痘病毒检测的过程中，对于猴痘病毒的全基因组检测至关重要。

mNGS检测流程图

（图片来自卫健委临床检验中心副主任李金明 报告）

近些年，随着二代测序在肿瘤诊断，无创基因筛查方面的大放异彩，其在致病性微生物感染领域，也逐渐开始发挥出了巨大的作用，尤其在解析未知感染、快速解析微生物全基因组、检测变异毒株等方面，有着荧光定量PCR技术不可达到的技术优势。

应用案例

近期猴痘病毒感染在欧洲的肆虐，基于宏基因组的NGS（mNGS）具有着广阔应用前景：

 

• 可快速解码猴痘病毒的全基因序列。

• 可随时且快速的对猴痘病毒的变异情况进行适时追踪，了对猴痘病毒变异株的检测时效。

• mNGS在鉴别诊断方面，也具有巨大优势：

      对猴痘病毒以及其他病毒的感染进行鉴别诊断；

      解码每个个体猴痘病毒的全基因组序列，进而实现对猴痘病毒进行适时的追踪溯源，为随后疫情的防控提供技术指导等。

汇像mNGS自动化解决方案

3

高通量ELISA自动化工作站

ELISA：enzyme linked immunosorbent assay，也称酶联免疫吸附测定，指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。近期国内已有多家用ELISA的方法检测猴痘病毒的特异性抗原与抗体的试剂盒，申请并通过了欧盟的CE认证。

应用案例

汇像高通量ELISA自动化工作站

高效安全：

精准快速加样，避免交叉污染，提升效率

自动化：

实现96孔板高通量Elisa样本自动加样、梯度稀释、洗板和酶标检测

虽然目前世界卫生组织使用qPCR或普通PCR的方法进行猴痘病毒的诊断，但ELISA依然被认为是作为检测或者筛查猴痘病毒的补充诊断手段之一。

结

语

● ●

在防控疫情过程中，对猴痘病毒的及时有效检测至关重要。汇像拥有高通量核酸检测、NGS二代测序和高通量ELISA等检测方法的自动化工作方案，能够快速锁定确诊者，确定病毒进化枝，控制疫情，为大家的生命安全保驾护航。

参考资料：

1 《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2097-2008》

2 《WHO-MPX-Laboratory-2022》

领域：分子诊断和芯片,传染病