类风湿关节炎（RA）是一种病因未明的慢性、以炎性滑膜炎为主的自身免疫性疾病。其特征是手、足小关节的多关节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，最终可以导致关节结构的破坏，畸形及功能丧失。类风湿关节炎（RA）的活性通过临床症状来评估。

近日，西班牙科鲁尼亚大学（CHUAC）生物医学研究所（INIBIC）的风湿病学研究小组，利用蛋白质组学策略寻找血清生物标志物，来区分具有不同类风湿关节炎（RA）活性的患者。

为便于蛋白质组学对血清进行复杂的检测,该研究小组对一种简单、快速、可重复的使用乙醇的白蛋白特异性消耗进行了优化,并将其应用于该研究所采用的样品中。通过质谱法分析了来自IMID联盟的80个样品，这些样品根据DAS28评分分为40个低活性和40个高活性。4个高RA活性样品的独立池（每个池10个样品）和4个低RA活性样品池首先耗尽白蛋白，然后将残留的血清蛋白质消化并用试剂进行差异标记。随后，将8个标记的池合并并使用微柱进行纯化。最后，通过HPLC分离池混合物，所得级分使用纳米LC-MS/MS（使用MALDI-TOF/TOF等）进行分析。

质谱分析共鉴定出186种蛋白质。在筛选步骤中，研究小组发现9种蛋白质的丰度在具有高（H）和低（L）RA活性的患者之间显著不同。研究小组使用蛋白质印迹法、蛋白质珠阵列和多重反应监测（MRM）与合成的重标记肽进行正交实验，验证了其中一些生物标志物候选物的RA活性。从MRM对来自同一队列的50个样品进行的验证结果显示了脂蛋白B（H/L=0.84，p=0.00），富含组氨酸糖蛋白（H/L=0.86，p=0.01）和血浆蛋白酶C1抑制剂（H/L=0.84，p=0.02）的减少。此外，该验证阶段还显示了触珠蛋白（H/L=1.34，p=0.01）和血清淀粉样蛋白A1（比率H/L=1.64，p=0.05）的增加，与筛选中观察到的结果一致。这些蛋白质与RA过程和由此类疾病（关节中的炎症和免疫紊乱）引起的效应有关。

最终，在该研究小组的蛋白质组学研究中，使用鸟枪和靶向质谱法发现了5种蛋白质在具有高和低RA活性的患者之间存在定量改变。

对于类风湿性关节炎等疾病的生物标志物分析，融智生物基于新一代宽谱定量飞行时间质谱平台QuanTOF推出的QuanTOF生物标志物分析系统，有助于解决相关医学检测难题并提供技术方案。

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类风湿性关节炎在全球的发病率为0.5%~1%，且该病在老年人口中的发病率更高。该病不仅给病人带来了极大的痛苦，更使他们丧失了劳动力，日常生活也受到了极大的影响。利用生物标志物对RA患者的病程和病情、遗传学背景、表观遗传学等特性做出综合判断，可以达到早期诊断疾病、疾病分层管理、合理使用药物的目的，从而实现RA的精准化诊治，提高RA患者的生存质量。

领域：临床生物化学/分子生物学,其他

标签：MALDI 关节炎 生物标记物