四步搞定四分文章

今天的推送是完完全全的干货啊

蛋白质组学技术大家应该都有所了解。今天，小编就结合一篇文章来说说蛋白质组学文章套路的问题，来来来，不浪费时间了，先上车（老司机带路）：

上面就是目前纯蛋白质组学文章发表的框架，下面就结合一篇最新的组学文章详细聊聊：

 

Journal of Proteomics IF=3.9140（2017.09）

Thyroid-associated orbitopathy and tears: A proteomics study

第一步：材料收集

表型差异材料：28例TAO病人和25例健康人的眼泪样品（病人和健康人各自混样）

第二步：组学定量分析

实验技术：2次独立的TMT六标实验

实验结果：两次分别定量到646和442个蛋白质组，汇总后一共检测到712个蛋白质组，其中376个蛋白质组两次都检测到。作者列出变化最明显的蛋白信息：

第三步：靶向蛋白验证

蛋白选择与验证方法：作者选择了三个蛋白后期进行靶向验证，Cystatin C（western blot），alpha-1 antichymotrypsin（ELISA）和retinal dehydrogenase 1（ELISA）；从蛋白选择也暴露了作者的小心机。

尤其注意，靶向验证阶段作者是一例例的进行检测的！！！

第四步：机制解析

最后，对这三个靶向验证的蛋白功能进行一系列的讨论分析，对文章的创新点进行一系列的总结。

…… 吧啦吧啦吧啦，你懂得！

 

蛋白质组学技术的广泛认可使得文章发表越加的有迹可循，上面的分析是不是给大家一个很清晰的套路了呢，嘿嘿。

另外，可能还有老师有个问题，万一我前期做了蛋白组，找到了想靶向验证的蛋白，可是，买不到抗体怎么办！！

等等！

别拦我，我要发大招了

针对没有抗体的蛋白靶向验证我们也有新的解决方案：Parallel Reaction Monitoring (PRM, 平行反应监测)

先来围观一下2012年发表在蛋白质组学领域的顶级期刊MCP上的这篇文献报道。

该文章对PRM技术进行了详细深入的报告和介绍。PRM结合了四级杆的高选择性及Orbitrap高分辨率的特点，能够对二级质谱进行独立的定性定量研究，方法流程更加简化之外，还具有优秀的抗背景噪音干扰能力。与WB实验相比，PRM还具有优秀的排除非特异结合蛋白干扰的能力。

 

前情回顾：

• 差异验证方法全解  助力老师们取得突破性的研究成果，发表更好、更高、更精的文章，始终是中科新生命的心愿之一。PRM验证开学钜惠活动您怎么能不了解一下呢？

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领域：蛋白/抗体/蛋白质组