面对全部有毒液（venom）物种，人们因为对蜘蛛过分恐惧而对其额外心存介蒂。实际上虽然所有的4万多种蜘蛛都有毒腺，但只有少数几种对人体有害，而且从统计学上看，蜘蛛咬人事件极少发生。
毒液本身是由质量不同的分子组成的混合物，毒素（toxin）只是其中一小部分。依据毒素作用方式可将其分为neurotoxins（神经毒素，作用于神经）、cardiotoxins（心脏毒素，作用于心脏）、haemorrhagins （作用于血管）、血液毒素（haemotoxins，作用于血液）、nephrotoxins﹙肾脏致毒物质，作用于肾﹚、necrotoxins（作用于组织）和myotoxins（肌肉毒素，作用于肌肉）。这些多变的生物学特征有助于人们根据药理学活性发现新成分。
现代毒液研究通常采用蛋白组学，因为这些混合物中的靶标是肽和/或蛋白。然而，许多研究局限于分子质量只有2－9 kDa的低分子量肽。梁宋平和来自湖南师范大学、北京大学的同事认为造成肽段质量小的主要原因，一是毒液中高分子量蛋白含量较少，二是缺少蜘蛛基因组和 cDNA文库。
梁与其同事研究毒液产量较大的中国狼蛛Chilobrachys jingzhao，以毒液中的肽和蛋白为靶标，寻找毒素和生物学活性成分。研究小组双面夹攻，最先进行凝胶过滤，将毒液中的分子按分子量以10kDa为标准分为两部分，然后利用各种分馏和质谱方法对各个组分进行分离提纯。
含量较少的蛋白片段首先利用双向电泳分离，然后利用胰岛素对各个蛋白点进行胶体内水解，利用基质辅助激光解析电离（Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization ，MALDI）MS/MS和肽质量指纹谱（peptide mass fingerprinting）技术分析所有消化的物质，但没有得到任何匹配物。研究人员对此并不感到奇怪，因为原本也没有蜘蛛的蛋白质组/基因组数据库。
对于这些消化物质的后备技术是MALDI MS/MS和LIFT技术的de novo测序，其中涉及到高能量碰撞和电喷雾离子化 LC/MS/MS。结果鉴别出90个蛋白点中的47个，发现了酶、血蓝蛋白、毒素样蛋白和许多未知或假定蛋白。这些酶与许多途径有关，但没有发现在其它狼蛛的毒液中已经研究得较为透彻的毒素成分。
质量在10 kDa 以下、含量较多的肽段，经过阳离子交换色谱被分为8部分，研究人员对各个部分分别进行反相HPLC分离共得到97种片段，然后利用MALDI MS 和Edman测序法对逐个分析这97种片段，结果得到了大约120种已知肽段，其中60种已经过全部或部分测序，70％以上的质量在3－5 kDa之间，10％的分子质量在5－8 kDa 之间，与其它狼蛛毒液研究结果一致。
所有经过全部测序的肽段都含有3或4个二硫键，大约30％的C末端被胺化，翻译后修饰很少，一些肽段与之前在这种蜘蛛中发现的jinzhaotoxins相匹配。
研究小组进行了系统发生分析，以便进一步弄清这些经过全序列测序肽段的生物学功能。一组似乎是杀虫毒素；第二组由钠离子和钾离子通道抑制剂组成，这些也是这种蜘蛛的主要毒素成分。这些结果为进一步研究中国狼蛛提供了参考资料，有助于寻找药用的生物活性特异的肽段和蛋白。
原文：Proteomics 2007, 7, 1892-1907: "Proteomic and peptidomic analysis of the venom from Chinese tarantula Chilobrachys jingzhao"
首页
