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同步荧光扫描技术

2018.3.23
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丁齐

致力于为分析测试行业奉献终身

根据激发和发射单色器在扫描过程中彼此间所保持的关系,同步扫描技术可以分为固定波长差、固定能量差以及可变角(可变波长)同步扫描。同步扫描技术具有使光谱简化、谱带窄化、提高分辨率、减少光谱重叠、提高选择性和减少散射光影响等优点。
固定波长差同步荧光光谱中,波长差的选择直接影响到同步荧光光谱的形状、带宽和信号强度,从而提供了一种提高选择性的途径。例如,酪氨酸(Tyrosine)和色氨酸(Tryptophan)的荧光激发光谱很相似,发射光谱又严重重叠,但是Δλ<15 nm的同步荧光光谱只显示酪氨酸的光谱特征,Δλ>60 nm的同步荧光光谱只显示色氨酸的光谱特征,从而可实现分别测定。目前,有关合适Δλ的选择已有若干理论研究,但是在实际应用中大多根据具体体系通过实验加以选择。在可能条件下,选择等于Stokes位移的Δλ值是有利的,有可能获得荧光信号最强、半峰宽最小的同步荧光光谱。
固定能量差(Δν)同步扫描可克服0-0带跃迁非常弱甚至不显示的情况下,以及不同组分对Δλ的不同要求所带来的困难。有可能对同一类化合物(如多环芳烃)只选择一个Δν值用于整个光谱的扫描,同时还能最大限度地减小瑞利散射(Raleigh Scattering)和拉曼散射(Raman Scattering)的干扰(陈培榕等, 1999)。
可变角同步扫描技术可进一步提高测量的选择性,由于在本论文中未涉及此项技术,在此不在赘述。

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