全自动血细胞分析仪在每日大量标本检测过程中,长达8h以上的工作时间,日常质量控制是非常重要的工作,除了要保证有一定的精密度外,还应保证其分析结果的准确度。为保证其正常运行和准确的测定,按ISO15189实验室规定仪器在分析前、分析中、分析后、更换试剂、仪器故障维修后等出现变数的情况下均需插入做质控,用于监测仪器的稳定性。配套的质控品价格昂贵需预定且数量有限,实验室多不可能做到多次插入质控品进行监测。仪器在测定过程中,偶然出现影响测定的各种故障和偶然因素,会导致偶然误差甚至系统误差。为解决此问题,我们使用正常新鲜血标本作为参考标本,用多次测定参考标本的方式监控仪器的工作状态和判断当日测定结果的稳定性。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1设备日本SYSMEX公司XE-2100型血细胞分析仪。
1.1.2试剂采用仪器原装进口配套试剂、校准品和质控物。
1.1.3器材广州阳普医疗科技有限公司提供的真空紫头采血管乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)和真空采血器。
1.2方法
1.2.1 参考标本的选择健康体检者静脉采血5mL用(EDTA -K2)抗凝,30min内测定结果,选择结果与配套的质控品结果相近的新鲜全血标本作为正常参考标本。
1.2.2用四种不同方式进行测试(1)方式一:每测30份病人标本插入1份正常参考标本和配套的质控品(以批号QC- 91730802质控品为例),共10次,观察仪器的精密度和重复性。(2)方式二:10份参考标本取血后10min,各连续测定6次,观察仪器在短时间内连续测定时血细胞的稳定性和最大连续性;(3)方式三:取10份参考标本,每份标本立即测定3次,室温放置8h后再测定3次,观察仪器在没有过多的干扰和取样情况下血细胞变化;(4)方式四:取10份血分别在采血后即刻1、2、4、6、和8h各测定1次,用以观察时间的延长、反复混匀和反复取样,以及标本量的不断减少,对血细胞可能产生的影响。
1.2.3按全自动血细胞分析仪操作规程规定,在分析前和分析中选配套的质控品进行质量控制并绘制Levey-Jennings质控图,监测仪器的工作状态,保证仪器当日的精密度和稳定性。
1.2.4统计学方法采用SPSS11.0统计学软件分析,数据以(χ±s)表示,组间比较采用t检验。
2结果
2.1方式一正常参考标本和SYSMEX配套质控品的均值、标准差和变异系数(表1)
由于XE-2100血细胞分析仪性能稳定,重复性好,变异系数允许范围在WBC≤3.00,RBC≤1.50,HB≤1.0,HCT≤1.5,PLT≤4.0之内;所以仪器配套质控品和正常参考标本的CV值均小于3%,见表1。用定值的新鲜血标本作为质控监测物,结果均优于配套质控物。说明新鲜全血在室温条件下WBC、RBC、HB、HCT、PLT 8h内多次测定的结果非常稳定。
2.2不同检测方式中每份标本最大标准差和最大变异系数
从表2实验数据表明四种检测方式中方式二SD,CV值均低于其他三种方式,结果重复性好,精密度高。方式三和四中产生偏差较大的项目为血小板和白细胞,这可能与时间的延长、标本反复混匀、反复取样、样品量的减少、样品自身稳定性等因素有关,但均在可接受范围内。各方式之间比较无显著性差异(P>0.05)。
3讨论
当前血液细胞分析仪多采用随机配套的全血质控物,由于配套校准物质成本高、有效期短等多种原因,难以得到普遍推广[1]。如果采用随机多次测定法,会给科室带来较大经济负担。为了解决此问题通过使用相对稳定的新鲜血作为参考标本,部分代替全血质控物来观察每日在各个时间段的工作情况,对仪器和试剂在更多的时间点上进行监测,从而达到保证全程质量控制和随机质量控制的目的。
用定值的新鲜全血标本作为质控监测物,其稳定性一般在室温18～25℃的条件下,8h内保持稳定[2]。四种检测方式中参考标本在室温条件下WBC、RBC、HB、HCT、PLT在8h内多次测定的结果非常稳定,偏差很小,重复性好,各参数变化幅度均不大,结果均优于配套质控物。方式一和方式四中各项指标可能随时间的延长,标本反复混匀、反复取样、标本量减少出现大小不等的变化;方式二中的实验数据表明,即刻测定对标本的稳定性影响最小,偏差也小,各参数变化幅度不大;方式一,方式三和方式四中的红细胞、血红蛋白及其参数比较稳定,这与红细胞本身比较稳定有关;白细胞会出现略微减低的现象,可能与外周血中白细胞寿命短暂、自然破坏损失有关。表2中参考标本各个项目与SYSMEX配套质控(以批号QC-91730802质控物以例)比较,前者显示了更好的精密度和稳定性,这可能与配套质控物需要保存更长时间应付反复取样和4℃低温条件保存等复杂环境,其浮动较大有关;各方式之间比较无显著性差异(P>0.05)。本试验缺陷是没有进行高值和低值的测定比较,还有待于以后探讨。
利用新鲜血对血液分析仪进行关于室内质控[3]、仪器校准[4-6]和比对[7]已有大量的应用文献报道。但是用在实时监控血细胞分析仪日常的常规工作中,通过此种方式进行室内质量控制的方法,很少报道。我们通过选择一份新鲜定值全血参考标本,多次、并在多个时间段上连续测定,对血细胞分析仪进行实时监控。这样可省却应用大量配套质控物所造成的检验成本上升和质控物浪费问题,是一个可行的室内、日内质量控制方法,可以间接证明仪器在当日每个测定时段都保持着很好的精密度和稳定性。从而及时发现失控问题,及时纠正失控原因,大大提高检验报告的可靠性和有效性,为临床诊断提高更准确的指标。因此,建立新鲜全血参考标本作为日内监控血细胞分析仪的工作状态的方案是行之有效的。
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