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LSCM的无荧光封固剂封片

2018.8.13
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JMCA

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对于荧光标记过的样品应该用无荧光封固剂封片,并尽量选择封片后可以凝固的无荧光封固剂,如 Mowiol  4 ~ 88 ( SIGMAProduce No.:81381)。如果临时封片,也可以封于 50% 甘油中,此时应尽量使用最少体积的液体,以减少样品移动。配制 Mowiol 封固剂时,在50mL 离心管中加入 2.4g Mowiol6g 甘油和 6mL去离子水,室温摇摆 2h,使 Mowiol 完全长大透明;再加入12mL 0.2 mol/LTris 溶液(pH8.5)50 摇摆过夜,直至Mowiol 完全溶解;4 000 ~ 5 000 rpm 离心 20 min;分装成每管 1 mL- 20  保存。使用时室温融化,通常每个22 mm ×22 mm 组织切片滴加15 ~20 μL,覆盖盖玻片,注意切勿加过量封片剂。封片后,避光放置于室温 4 h 或过夜,待封片剂凝固后,即可在荧光显微镜油镜下观察,进而进行激光共聚焦显微镜图像扫描,以上样品可收集于载玻片盒中 4 保存。

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