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血细胞分析仪测定问题及读片分析病例:退化细胞增加

2018.8.20
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韩金龙

致力于为分析测试行业奉献终身

具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪的应用目前越来越广泛,其性能明显优于阻抗法的三分群血细胞分析仪,他在白细胞分类上具有明显优势,自动化程度较高,已有文献对其测定原理进行过详细的介绍。但是目前再好的血细胞分析仪都有其特定的缺陷和不足,作者曾在发表过的文章中指出:“目前无论是五分类还是更多分类的仪器,仍然不能根本解决血细胞形态学的问题,不能完全以仪器分类取代人工分类。各种仪器都不会是圆满的,各仪器均有特殊的缺陷和局限性,因此仍然会有各种问题发生”。


国际血液学复检专家组在2005年经过大量实验数据提出了《自动血细胞计数和白细胞分类计数的复检规则》(简称复检规则)41条给我们提供了很好的借鉴,是对血细胞分析仪测定结果报告规则的良好补充。参照复检规则的制定原则,各个医院均应评价自己所应用的仪器的性能,根据医院的特点、服务对象和相关要求,制定自己医院的血细胞分析仪筛检规则。


目前无论是五分类还是更多的分类的仪器,仍然不能根本解决血液细胞形态学的问题,不能完全以仪器分类结果彻底取代人工分类。各种仪器都不会是圆满的,各仪器均有特殊的缺陷和局限性,因此仍然会有各种问题发生。


以下介绍的典型病例资料,其血液分析仪测定结果与患者实际情况明显不符,通过观察仪器测定数据、直方图、散点图、临床诊断等,对结果的真实性提出质疑,并根据相关的复检规则进行血涂片复检,或者采用其他方法复查等技术手段进行复核,找到问题,解决问题,给临床医生和患者回报真实的结果。本文8个病例涉及到对血液分析仪数据、散点图、直方图的“读片”,同时对该样本的血片进行读片,进行讨论,共同面对和解决这些比较特殊的血液细胞分析问题并获取经验。所用仪器以Sysmex公司XE-2100和Siemens公司Advia 120/2120型仪器为主,其他厂家或不同型号的仪器可能会有不同的表达方法。


病例1:退化细胞增加


退形性变(degeneration):胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀、核溶解等现象。胞质破裂后消失,只剩胞膜,则成裸核或篮状细胞(basket cell)。退形性变亦可见于衰老细胞,在正常情况下为数极少。


一 患者资料:


A:何×,男,74,临床诊断:脑梗死后遗症。

B:汪××,男,79,临床诊断:体检。


二 血细胞分析仪测定结果的相关数据如下(见表1-1)


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三 血细胞分析仪散点图、直方图和测定数据


病例A在血细胞分析仪 XE-2100上测定的数据和散点图(图1-1)


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病例B在血细胞分析仪 XE-2100上测定的数据和散点图(图1-2)


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病例B在血细胞分析仪Advia-120上的测定数据和散点图(图1-3)


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四 血涂片


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两患者血涂片中均见数量较多的退化细胞或破损变形细胞,这些细胞形态各异,细胞膜、胞浆、核结构均模糊,难以区分和辨别其类别。


五 血细胞涂片相关的复检规则


按照血细胞涂片复检规则中相关条款,其测定数据中部分内容符合第18条:淋巴细胞绝对计数值(Lymph#):(1)复检条件,首次结果>5.0×10^9/L(成人)或>7.0×10^9/L(<12岁)。(2)复检要求:涂片镜检。


对该样本同时还进行了显微镜下用计算盘直接计数核对,结果白细胞数量与仪器计数法基本一致。血涂片中出现较多的退化细胞或破损细胞,实际在进行血片分类时这类细胞是不被计入任何一类细胞的。但是作为一种裸核的细胞成分,这些颗粒也会被仪器计入细胞总数中,而且被归类于淋巴细胞群中,造成淋巴细胞假性升高,如表1-1中的测定数据,与人工显微镜分类结果有明显不同。


六 结果讨论


1.显微镜下白细胞分类时是否计入,是否向临床提示这种细胞增多?增多的临床意义?


在进行血涂片的显微镜下检查时,一般分类细胞膜和核等结构完整的细胞,对退化细胞不做分类,但是见到此类细胞增加是可以在检验单中注明。退行性变的白细胞常见的形态有包体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀、核溶解等。如果胞质破裂后消失会变成裸核细胞或叫做蓝细胞。轻度少量出现的时候没有临床意义,当大量出现的时候应该引起注意,特别是慢性淋巴细胞白血病患者。


2.血细胞分析仪测定时,这类细胞会被计入白细胞总数中吗?


笔者曾经与多位同行讨论,因为血细胞计数仪器是颗粒计数器,此等大小的细胞核结构同样会被计入细胞总数,而且会分类到小细胞群或淋巴细胞群中。会影响分类的结果,本两个病例正好说明此问题,如果人工显微镜分类,这类细胞会被检出,不计入淋巴细胞中,故分类结果与仪器分类结果会有明显不同。在显微镜下的计数板上,同样不能识别出裸核的细胞,因此也会被计数到白细胞总数中。


3. 仪器计数时,这类细胞会被分类计数到那类细胞中?仪器会有报警吗?报什么信息?


前面已经谈到其分类时的问题,此两例均未出现报警,特别是没有出现异常淋巴细胞ATYP的报警,仅仅表现为淋巴细胞百分比和绝对值的异常增高,应当引起注意。在签发报告时要注意观察淋巴细胞总数和百分比,必要时一定分类复核。


4. 退化细胞增多时对应的解决方案?


退化细胞增多有两种可能,可能有人工推片造成的机械性破坏的假性改变和真性退化现象,可采用适当的方法进行区分。如果反复多推几张血片,适当改变推片角度和用力,如果不再出现退化细胞增多,可以判断为推片因素,这样可以初步排除假性细胞退化现象。但是更科学的方法是进行活细胞染色,用于判别真性细胞退化现象。


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