高速逆流色谱分离制备椭圆叶花锚中的2 种口山酮苷元

摘要: 椭圆叶花锚的主要活性成分为口山酮类化合物，这类化合物具有利胆、抗炎、抗菌及抗病毒活性。应用高速逆流色谱法建立了2 种高纯度口山酮苷元的分离制备方法。对椭圆叶花锚氯仿萃取部位运用高速逆流色谱分离纯化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水( 5∶ 5∶ 7∶ 5，v /v /v /v) 为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相。在主机转速800r /min，流动相流速1. 5 mL/min，检测波长254 nm 条件下进行分离制备。所得产物经高效液相色谱分析检测，其化学结构由核磁共振氢谱( 1H NMR) 和核磁共振碳谱( 13C NMR) 鉴定。在此条件下，从100 mg 粗样品中一步分离得到18 mg 1-羟基-2，3，5-三甲氧基口山酮， 14 mg 1-羟基-2，3，4，5-四甲氧基口山酮。经高效液相色谱分析，其纯度均达98%以上。该方法简便、快速，所得产物纯度高，适合于椭圆叶花锚口山酮苷元的制备分离。

    椭圆叶花锚( Halenia elliptica ) 系龙胆科( Gentianaceae) 花锚属( Halenia) 植物，是藏药中治疗肝胆系统疾病的常用药物之一［1］。临床上，椭圆叶花锚多用于治疗小儿急性黄疸肝炎和小儿急性乙型肝炎，疗效显著［2，3］。已有研究表明，椭圆叶花锚中口山酮苷类物质具有抗肝炎的作用［4］，但其生物活性则主要是通过转化为口山酮苷元产生［5］。目前，有关椭圆叶花锚口山酮成分分离的研究报道大多采用传统柱色谱方法［6 － 10］，存在样品组分损失、玷污、变性、失活、拖尾，分离困难，收率低等不足。高速逆流色谱( high-speed couter-current chromatography，HSCCC) 是一种不使用固态支撑体或载体的液液分配色谱技术。其克服了固相载体对样品的吸附而产生的损失、变性等缺点，并可以在短时间内实现高效制备性分离，因而在植物有效成分的分离与制备方面得到了广泛的应用［11 － 13］。本研究采用HSCCC技术对椭圆叶花锚中口山酮苷元成分进行了分离制备与纯化，得到两种高纯度的口山酮苷元( 1-羟基-2，3，5-三甲氧基口山酮( I) 和1-羟基-2，3，4，5-四甲氧基口山酮( II) ) ，为其进一步药用开发研究提供技术支撑。