摘　要　采用高速逆流色谱法分离纯化秦艽地上部分中的龙胆苦苷。溶剂系统为V (氯仿) ∶V (甲醇) ∶V (水) =4∶4∶2, 上相为固定相,下相为流动相,转速为800 r/min,流速为2 mL /min。所得产物经LC2MS分析为龙胆苦苷,纯度经高效液相色谱分析为94. 0% (峰面积归一化法) 。在保证分离效果的前提下,增大进样量,摸索制备分离龙胆苦苷的高速逆流色谱条件,为用高速逆流色谱法大量制备龙胆苦苷提供了一个可行方法。
关键词　高速逆流色谱法,龙胆苦苷,秦艽

    秦艽为龙胆科植物大叶秦艽(Gen tiana m acrophylla Pall ) 、麻花秦艽(Gentiana stram inea M axim ) ,粗茎秦艽(Gentiana crassicaulis Du thie ex B u rk)和小秦艽(Gentiana dahurica Fisch)的总称,是我国重要的传统药材。《神农本草经》列其为中品,“秦艽主寒热邪气,寒湿风痹肢节痛,下水,利小便。”[ 1 ]其主要成分龙胆苦苷有抗炎、镇痛、保肝、利胆等作用[ 2 ] ,是在研中药的一类新药,需求量较大。目前,秦艽属于濒危药材[ 3 ] ,资源匮乏,因此寻找其代替品及扩大用药部位成了一个需要解决的问题。研究发现,龙胆苦苷不只存在于根中,地上部分亦含有大量龙胆苦苷[ 4 ] ,而传统柱色谱法分离龙胆苦苷周期长,试剂消耗量大,所用固定相对样品有不可逆性吸附作用,并且不容易提纯。
    高速逆流色谱不用任何固体支撑或载体,克服了传统分离方法对样品的不可逆性吸附作用的缺点,因而样品回收率高。同时,还具有应用范围广、仪器操作简单、分离量大等优点,因此被广泛应用于天然产物的分离制备[ 5 ] 。
    本实验采用高速逆流色谱法,优化了分离龙胆苦苷的最佳溶剂体系,最终从秦艽地上部分粗提物中一次性分离得到纯度94. 0%以上的龙胆苦苷150 mg,达到了制备分离的目的。