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紫外可见分光光度计检测羧甲基纤维素酶活性

2018.9.26
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Genera

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羧甲基纤维素酶

【酶活测定】在0.5mL适当稀释的酶液中加入质量分数为0.625%的羧甲基纤维素钠溶液,于50℃水浴中保温30min,加2.0 mL质量分数为10%的NaOH溶液终止反应,再加入2.5mLDNS试剂,于沸水浴中煮沸15min,冷却,在550 nm波长处比色,要求光密度读数尽可能在标准曲线的0. 5 mg葡萄糖处。每次测定均设立空白对照,对照管先加入0.5mL酶液,然后加入2. 0 mL质量分数为10%的NaOH溶液将酶灭活,再依次加入质量分数为0.625%的底物2. 0 mL,与待测管一起保温,加入DNS,煮沸、冷却、稀释比色、与标准曲线对照。

【酶活定义】在上述条件下,每30min产生0.5mg还原糖为1个Cx活力单位,即每1 h产生1.0mg还原糖为1个Cx活力单位。


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