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全自动定氮仪检测酒糟蛋白质含量的操作步骤

2018.11.27
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

  酿酒后的酒糟含有大量蛋白质、纤维素等,可作为开发蛋白质的原料。目前常用于检测蛋白质的方法主要有4种:全自动定氮仪法、双缩脲法、Folin-酚试剂法和紫外吸收法。下面就先简单的说说全自动定氮仪方法的操作步骤:
  
  首先是样品的提取:

     精确称取1g左右酒糟粉末样品2份于高腰烧杯中,力2gKZSO4-CuS04"SH20混合物及SOmL消化液。用电炉小火加热,溶液呈棕黄色,且有泡沫产生。继续加热,产生大量泡沫,溶液呈浅黄绿色并有大量SOZ白烟产生,待酒糟焦化完全,取下烧杯,稍冷,加入2-3滴30%的H202溶液,继续消化至白烟消失,溶液变为澄清的绿色,即消解完成。将消解液稍冷(以防结晶)后转移至离心管,用二次蒸馏水洗涤烧杯2-3次,洗液一并注入离心管中,于2500r/min下离心15min,将离心液转移至SOmL容量瓶,定容,备用。按同样方法消化试剂空白液。
  
  其次是氨气发生与吸收:

  1)取250mL锥形瓶数个,分别加入SmL2%硼酸和2滴混合指示剂备用。

  2)关闭冷凝水,打开自由夹,使蒸汽发生器与大气相通。将一个盛有硼酸和指示剂的锥形瓶放在冷凝器下,使冷凝器下端浸没在液体内。

  3)用吸量管取S.OOmL酒糟样品消化液,细心地由加样室下端加入反应室,随后加入7.OmL30%的NaOH,用少量蒸馏水洗涤加样室,关闭自由夹,在加样漏斗中加入少量水做水封。关闭自由夹(图中2),缓慢打开冷凝水。用酒精灯加热蒸汽发生器,当观察到锥形瓶中溶液由酒红色变为绿色时,蒸馏约lOmin后,移开锥形瓶,使冷凝器下端离开液而约1cm,同时用少量蒸馏水洗涤冷凝管口外侧,继续蒸馏2min-3min,取下锥形瓶。

  C4)蒸馏完毕后,移开酒精灯,使反应室中废液溢出。全自动定氮仪待冷却至室温后,将仪器取下,打开自由夹,将蒸汽发生器内的全部废水放出,用蒸馏水清洗反应室2-3次。组装装置,接通冷凝水,按如前所述方法洗涤蒸馏器2-3次,准备下一次蒸馏。

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