垂直电泳槽的样品制备和装载过程

    垂直电泳槽是用来对少量的核酸及蛋白质样品进行垂直电泳的装置，玻璃板与垫条的一体化设计确保垫条表面及垫条制胶密封端的平整，彻底防止漏液，适用于生物学研究中，对核酸、蛋白样品的分离、纯化、制备等。今天就让我们了解一下垂直电泳槽的样品制备和装载过程。

    1、将试管插入至制冷恒温金属浴，以解冻冷冻牛血清白蛋白样品。 然后加入25μl 4X蛋白染料及75 μl的已解冻牛血清白蛋白溶液。

    2、把样品加样到凝胶中前，请在恒温金属浴中以95℃的温度煮沸混合好的 BSA样品、预染标记和 ProMarker，5分钟。

    3、向凝胶中装载样品前，用100μl的移液器轻轻抽放缓冲液冲洗井孔让样品孔更平滑。在把样品放入凝胶前，做简单离心与混匀保证蛋白溶液浓度不变。在每个孔中注入10μl的蛋白质样品。

    4、将安全盖安装到槽顶部，并将电极导线连接至电源。

    5、开始电泳：90V运行60分钟，130V再运行60分钟。

    6、电泳后，将胶铲插入到两玻璃板之间，轻轻来回撬动直到两板分开，把凝胶从玻璃板上移除。除去上层胶，用考马斯亮蓝溶液染色下层分离胶15分钟。

    7、将凝胶置于脱色缓冲液过夜震荡进行脱色。

    8、通过凝胶成像分析系统的紫外/白光转换板拍照。