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酶联免疫检测仪操作方法

2019.3.01
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zhaochenxu

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1. 牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。可简单地分为半自动和全自动2大类,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一个比色计,即用比色法来进行分析。 测定一般要求测试液的zui终体积在250μL以下,用一般光电比色计无法完成测试,因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。检测单位用OD值表示, OD是optical density(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度, OD=log(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:
E=OD=log(lo/Ι) 其中E表示被吸收的光密度, Ιo 为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。
OD值公式计算:
c为检测物的浓度 b为检测物的厚度 a为摩尔因子
牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收zui多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。
检测值计算
仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,为4095。仪器定义没有光源下的透光值为 0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在 0%一100%之间。

牛流行性腹泻病毒PCR-荧光探针试剂盒透光值的计算如下:
T=(Meas-Min)/(Max-Min)
其中T为透光值, Meas为检测的二进位数值, Min为在 0%的情况下检测的二进位数值, Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下:
MaX=3600
Min=20
Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028
OD=log(1/T)=log(1/0.0028)=2.552


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