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酵母菌基因组DNA的提取实验——基本方案

2019.3.25
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
实验材料

酵母菌

试剂、试剂盒

SE缓冲液山梨醇EDTA溶菌酶PVP蛋白酶K缓冲液Tris

仪器、耗材

高速冷冻离心机台式离心机恒温水浴低温冰箱冷冻真空干燥器取液器电泳仪水平电泳槽紫外观测仪

实验步骤

1.  1.5 ml  对数生长期细菌细胞。


2.  离心，12 000 rpm，1-2 min。


3.  沉淀。

4.  溶于590 ul SE缓冲液中混匀+10 ul 溶菌酶37℃，1 hr。


5.  离心，12 000 rpm，8~10 min。


6.  沉淀。


7.  溶于100 μL，0.5 μl 蛋白酶K，混匀，37℃，1 hr。


8.  加入1.2 ml 的CTAB/NaCL，200 μl 2 0%PVP 混匀  65℃，30 min。


9.  等体积酚/氯仿/异戊醇混合液，混匀。


10.  离心，12 000 rpm，4~5 min。


dna的提取
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