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Southern 印迹实验——碱性缓冲液法

2019.3.26
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身
实验方法原理

用带正电荷的尼龙膜时，如果用碱性转移缓冲液，则转移的DNA可共价结合于膜上。

实验材料

DNA

试剂、试剂盒

NaOHNaCl

仪器、耗材

电泳仪

实验步骤

1.  印迹法中步骤1和歩骤2中所述准备凝胶及用0.25 mol/l HCl处理。

2.  用蒸馏水漂洗凝胶，并用10倍体积的0.4 mol/l NaOH变性，缓慢摇动20 min。

 

3.  用0.4 mol/l NaOH替代20xSSC作为转移液进行转印。转印时间≥2 h。

 

4.  取出膜，用2xSSC漂洗，置于一张Whatman 3 MM 滤纸上晾干，保存于室温。


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