作者已经有办法检测 HSV-IIE 基因功能并继而通过同源重组把外源基因引入 HSV-I 基因组。由于有些 HSV-IIE 基因—转染细胞蛋白 4(ICP4) 和 27(ICP27)—对所培养细胞的生长是很必要的,反向表达这些基因产物以补足细胞系对于分离和繁殖复制缺陷型病毒突变体是很有必要的。
基本方案1 构建 HSV-1 IE基因补足型细胞系
实验材料 | |
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试剂、试剂盒 | 酶 EDTA2 X HEPES 缓冲盐CaCl2甘油新霉素盐溶液冻存培养基PBSDNA 浓缩缓冲液10 X PCR 扩增缓冲液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶结晶紫染液 |
仪器、耗材 | |
实验步骤 |