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双重PCR实验

2019.3.27
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zhaochenxu

致力于为分析测试行业奉献终身

随着转基因农作物的大量种植,其安全性问题也日益受到人们的重视。2002年我国要求对转基因农作物实行标签管理。抗草甘膦(glyphosate)大豆 (商品名,roundup ready soybean)是在传统大豆株Variety A5403中转入外源基因CAMV-35S启动子、抗草甘膦基因CP4-EPSPS和NOS终止子而得到。它是目前使用最广的转基因作物之一,每年至少有 800万吨转基因大豆进入我国市场。因此,研究抗草甘膦大豆的快速检测方法具有重要意义。目前采用PCR检测转基因大豆的方法大多是采用琼脂糖凝胶电泳 法,首先检测CAMV-35S启动子和NOS终止子进行筛选,然后检测EPSPS抗草甘膦基因,操作烦琐、费时。本研究利用双重PCR技术同时扩增上述基 因片段,用激光诱导荧光-毛细管电泳高效、快速检测PCR产物,显著提高了检测效率,并使灵敏度大为增加。本方法所需样品量少(nl级),快速、灵敏和准 确,已成功用于实际转基因大豆样品的分析。


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