由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可从各种样品中提取 RNA,且产量和质量非常稳定。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。
试剂、试剂盒 | 乙醇β-巯基乙醇 |
---|
仪器、耗材 | 转子-定子均化器或类似设备Marligen Rapid Total RNA System |
---|
实验步骤 | 一、材料
1.缓冲液、溶液和试剂
乙醇,70%和100%
β-巯基乙醇
2.特殊设备
转子-定子均化器或类似设备
3.其他
Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)
二、方法
(1)加β-巯基乙醇制备裂解溶液。
(2)按照厂商的方案要求,向细胞和组织样品中加裂解溶液(裂解液体积取决于所处理样品的大小)。用转子-定子均化器或类似设备均化。
(3)向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。
(4)将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中,在微量离心机中12000~16000g离心。
(5)用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次,12000~16000g离心1min。
(6)用洗涤缓冲液2洗涤两次,每次500ul,12000~16000g离心1min。
(7)12000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。
(8)参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱,样品较多可用20ul水洗脱。
展开 |
---|